É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:00Título
- 00:05Introduction
- 01:01Cell Preparation
- 02:28Immunofluorescence Staining
- 05:00Microscopy
- 06:12Analysis Foci Counting
- 07:56Analysis Line Scan
- 08:39Analysis 3D-Image Reconstruction
- 09:09Conclusion
L'analyse microscopique des γH2AX foyers, qui forment la suite de la phosphorylation de H2AX à Ser-139, en réponse à l'ADN des cassures double brin, est devenu un outil précieux dans la radiobiologie. Ici nous avons utilisé un anticorps mono-méthylé histone H3 lysine à 4 comme un marqueur épigénétique de la transcription euchromatine active, afin d'évaluer la distribution spatiale du rayonnement induit par la formation γH2AX au sein du noyau.
Tags
Spatial DistributionγH2AXIonizing RadiationDNA Double-strand Breaks (DSBs)Ser-139 ResidueHistone H2AXPhosphorylationPhosphatidyl-inosito 3-kinase (PI3K) FamilyAtaxia Telangiectasia Mutated (ATM)DNA-protein Kinase Catalytic SubunitATM And RAD3-related (ATR)Immunofluorescence MicroscopyγH2AX FociDSB Formation And RepairRadiation Modifying CompoundsCytotoxic CompoundsDNA Damage And RepairChromatin Templateγ-irradiation-induced γH2AX Foci
