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Neurociência
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Calcium Imaging in Neurons
  • 00:00Visão Geral
  • 00:49Biochemistry of Calcium Indicator Dyes
  • 03:03Procedure for Calcium Imaging in Neurons
  • 06:33Applications
  • 08:11Summary

Imageamento de cálcio em neurônios

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Visão Geral

Os íons de cálcio desempenham um papel integral na função dos neurônios: eles agem como sinais intracelulares que podem obter respostas como expressão genética alterada e liberação de neurotransmissores de vesículas sinápticas. Dentro da célula, a concentração de cálcio é altamente dinâmica devido à presença de bombas que transportam seletivamente esses íons em resposta a uma variedade de sinais. A imagem de cálcio aproveita o fluxo de cálcio intracelular para visualizar diretamente a sinalização de cálcio em neurônios vivos.

Este vídeo começa com uma visão geral dos reagentes-chave usados para esta técnica, conhecidos como corantes indicadores de cálcio. A discussão inclui uma introdução ao corante comumente utilizado Fura-2 e alguns princípios básicos por trás de como funcionam indicadores de cálcio ratiométrico e não-ratiométrico. Em seguida, é apresentado um típico experimento de imagem de cálcio, desde o preparo das células e corante até a captura e análise das imagens fluorescentes. Finalmente, são fornecidas várias aplicações experimentais de imagem de cálcio, como o estudo da atividade da rede neuronal e do processamento sensorial.

Procedimento

A imagem de cálcio é uma técnica extremamente útil para investigar a variedade de papéis que os íons de cálcio têm no funcionamento dos neurônios. Íons de cálcio geram uma infinidade de sinais intracelulares que controlam funções-chave, como a liberação de neurotransmissores de vesículas sinápticas. Os métodos de imagem de cálcio permitem a medição direta do fluxo dinâmico de cálcio dentro dos neurônios e do tecido neuronal. Este vídeo fornece uma visão geral de como os corantes indicadores de c?…

Declarações

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Calcium Imaging in Neurons. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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