Hibridização in situ de montagem completa

Hibridização in situ (WMISH) é uma técnica comum usada para visualizar a localização de RNAs expressos em embriões. Nesse processo, as sondas RNA produzidas sinteticamente são primeiro complementarmente ligadas, ou “hibridizadas”, às transcrições dos genes-alvo. A imunohistoquímica ou fluorescência é então usada para detectar esses híbridos de RNA, revelando padrões espaciais e temporais de expressão genética. Ao contrário das técnicas tradicionais de hibridização in situ, que requerem seções de tecido fino cujas imagens precisarão ser remontadas computacionalmente, a técnica de montagem total permite que padrões de expressão genética sejam avaliados sobre todo o embrião ou estrutura.

Este vídeo introduzirá os conceitos básicos de coloração de montagem inteira e detalhar as principais etapas processuais, incluindo projeto e produção da sonda, fixação e coloração de embriões e detecção de sinal pós-hibridização. Os espectadores aprenderão sobre como os biólogos do desenvolvimento estão aplicando OMISH aos estudos atuais de pesquisa.