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Recombinante α-β e γ-Synucleins estimular a proteína fosfatase 2A subunidade catalítica atividade ensaios em células grátis
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Neurociência
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JoVE Journal Neurociência
Recombinant α- β- and γ-Synucleins Stimulate Protein Phosphatase 2A Catalytic Subunit Activity in Cell Free Assays
DOI:

09:36 min

August 13, 2017

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Capítulos

  • 00:00Título
  • 00:33Preparation of Buffers and Reagents
  • 00:38Preparing p-Nitrophenol Phosphate (pNPP) Buffer
  • 01:21Preparing Malachite Green Solution
  • 02:21Preparation of Activator
  • 02:42Preparing Malachite Green + Tween 20 (MGT) Working Solution
  • 02:58Preparing Threonine Phosphopeptide (pT)
  • 03:31Synuclein Preparation
  • 03:59Preparing Phosphate Standards
  • 04:45Phosphate Standards Step 2
  • 05:17PP2A Activity Assay
  • 06:42Photometric Analysis
  • 06:53Representative Results
  • 09:01Conclusion

Summary

Tadução automática

Esta publicação apresenta um protocolo mostrando como medir a atividade da proteína recombinante fosfatase 2A catalítico o subunit (PP2Ac) em resposta a recombinante synuclein-α, β-synuclein ou proteínas γ-synuclein usando um simples ensaio colorimetric. Mostramos a conclusões a respeito da especificidade do α-synuclein para PP2Ac no cérebro de rato.

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