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Immunoblotting या प्रोटियोमिक् द्वारा प्रोटीन स्थानीयकरण के विश्लेषण के लिए Arabidopsis से Chloroplast उप-डिब्बों की तैयारी
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Capítulos
- 00:04Título
- 01:01Harvesting of Arabidopsis Leaves
- 02:26Purification of Crude Chloroplasts Using Differential Centrifugation
- 03:30Purification of Intact Chloroplasts on Continuous Percoll Gradient
- 04:51Lysis of Intact Chloroplasts Using a Hypotonic Buffer and Purification of Chloroplast Sub-Compartments on Discontinuous Sucrose Gradients
- 06:05Washing and Concentration of Thylakoid and Envelope Membrane Systems
- 07:09Results: Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics
- 08:44Conclusion
यहां, हम एक विधि का वर्णन करने के लिए Arabidopsis पत्तियों और उनके तीन मुख्य उप डिब्बों से बरकरार chloroplasts शुद्ध (लिफाफा, स्ट्रोमा, और thylakoids), अंतर केंद्रापसारक के एक संयोजन का उपयोग, सतत Percoll ढाल, और निरंतर सुक्रोज ग्रैडिएंट । विधि immunoblotting और प्रोटियोमिक् द्वारा प्रोटीन के subplastidial और सेलुलर स्थानीयकरण के लिए मूल्यवान है ।
