Journal
/
/
Utarbeidelse av Chloroplast sub deler fra Arabidopsis for analyse av Protein lokalisering av Immunoblotting eller Proteomikk
JoVE Journal
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioquímica
Preparation of Chloroplast Sub-compartments from Arabidopsis for the Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics
DOI:

10:28 min

October 19, 2018

, , , ,

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:01Harvesting of Arabidopsis Leaves
  • 02:26Purification of Crude Chloroplasts Using Differential Centrifugation
  • 03:30Purification of Intact Chloroplasts on Continuous Percoll Gradient
  • 04:51Lysis of Intact Chloroplasts Using a Hypotonic Buffer and Purification of Chloroplast Sub-Compartments on Discontinuous Sucrose Gradients
  • 06:05Washing and Concentration of Thylakoid and Envelope Membrane Systems
  • 07:09Results: Analysis of Protein Localization by Immunoblotting or Proteomics
  • 08:44Conclusion

Summary

Tadução automática

Her vi beskriver en metode for å rense intakt chloroplasts fra Arabidopsis blader og deres tre viktigste sub avdelinger (konvolutt, stroma og thylakoids), en kombinasjon av differensial centrifugations, kontinuerlig Percoll graderinger, og usammenhengende sukrose graderinger. Metoden er nyttig for subplastidial og subcellular lokalisering av proteiner av immunoblotting og Proteomikk.

Vídeos Relacionados

Read Article