É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:04Título
- 00:49The High Titer sgRNA Library Lentivirus Generation
- 01:44Titration of Lentiviral Library in MOLM13 Leukemia Cells
- 02:59Transduction of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library
- 04:20Screening of the Pooled CRISPR-Cas9 KO Library with One-Step RT-qPCR
- 05:41Verification of Integrated sgRNAs Positive Clones through Genotyping and Sanger Sequence
- 06:37Detection of sgRNAs Induced Indel Mutation by Nuclease Digestion Assay
- 07:48Results: Pooled CRISPR-Cas9 KO Library Screening and Identification
- 09:19Conclusion
Библиотеку ТРИФОСФАТЫ/sgRNA был применен для допроса белка кодирование генов. Однако возможности библиотеки sgRNA раскрыть функцию CTCF границы в регуляции генов остается неизведанной. Здесь мы описываем библиотеки конкретных sgRNA Гомеозисных локусов для выяснения функцию CTCF границ в Гомеозисных локусов.
