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Enriquecimento de uma única etapa de um histone TAP-Tagged deacetilase do fungo filamentoso Aspergillus nidulans para o ensaio de atividade enzimática
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Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Single-Step Enrichment of a TAP-Tagged Histone Deacetylase of the Filamentous Fungus Aspergillus nidulans for Enzymatic Activity Assay

Enriquecimento de uma única etapa de um histone TAP-Tagged deacetilase do fungo filamentoso Aspergillus nidulans para o ensaio de atividade enzimática

DOI:
10.3791/59527-v

•

09:07 min

•

May 01, 2019

•

, , , ,
1Division of Molecular Biology, Biocenter,Medical University of Innsbruck, 2Biology Department,Maynooth University, 3Maynooth University Human Health Research Institute

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:53Inoculum Preparation
  • 01:34Growth and Harvesting of Mycelia
  • 02:36Preparation of the Protein Extract and Equilibration of the IgG Resin
  • 04:40Batch Purification of TAP-tagged HDAC
  • 06:50Results: Analysis of the Purification and Enzymatic Activity Assay
  • 08:29Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

As deacetilases da histona da classe 1 (HDACs) como RpdA ganharam a importância como alvos potenciais para tratar infecções fungosas. Aqui nós apresentamos um protocolo para o enriquecimento específico de rpda Tap-Tagged combinado com um ensaio da atividade de HDAC que permita in vitro o teste da eficácia de inibidores da deacetilase do histona.

Tags

TAP-taggedHistone DeacetylaseAspergillus NidulansEnzymatic Activity AssayClass 1 Histone DeacetylasesRpdAFungal InfectionsHDAC ComplexesFungal-specific Deacetylase InhibitorsConidiaMyceliaLyophilizationBall MillExtraction Buffer

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