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Un saggio di assenza di stasse reattiva (DARTS) di affinità dei farmaci semi-quantitativa per studiare l'interazione tra Rapamicina e mTOR
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
A Semi-Quantitative Drug Affinity Responsive Target Stability (DARTS) assay for studying Rapamycin/mTOR interaction
DOI:

00:05 min

August 27, 2019

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Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:47Collect and Lyse Cells
  • 01:59Incubate Protein Lysates with the Small Molecule and Perform Proteolysis
  • 03:28Western Blot Analysis
  • 03:59Results: Rapamycin Inhibition
  • 05:03Conclusion

Summary

Tadução automática

In questo studio, abbiamo migliorato le capacità di analisi dei dati dell'esperimento DARTS monitorando i cambiamenti nella stabilità delle proteine e stimando l'affinità delle interazioni proteina-ligando. Le interazioni possono essere tracciate in due curve: una curva proteolitica e una curva di dipendenza da dose. Abbiamo usato l'interazione mTOR-rapamycin come caso esemplare.

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