Journal
/
Biologia
/
Sanntidsovervåking av Aurora kinase A-aktivering ved hjelp av konforme FRET Biosensorer i levende celler
JoVE Journal
Biologia
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
Real-Time Monitoring of Aurora kinase A Activation using Conformational FRET Biosensors in Live Cells

Sanntidsovervåking av Aurora kinase A-aktivering ved hjelp av konforme FRET Biosensorer i levende celler

DOI:
10.3791/61611-v

•

06:29 min

•

July 30, 2020

•

, ,
1Univ Rennes, CNRS, IGDR (Genetics and Development Institute of Rennes), UMR 6290, F-35000 Rennes, France

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:36Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection
  • 01:13Cell Synchronization
  • 01:42FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions
  • 02:50Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison
  • 03:53Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images
  • 05:52Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aktiveringen av den multifunksjonelle Ser/Thr kinase AURKA er preget av autofosforylering på Thr288. Fluorescerende sonder som er avhengige av FRET, kan diskriminere mellom inaktive og aktiverte tilstander. Her illustrerer vi noen strategier for sondeteknikk, sammen med en rask FRET-protokoll for å følge kinaseaktiveringen gjennom mitose.

Tags

Keywords: Real-time MonitoringAurora Kinase AConformational FRET BiosensorsLive CellsFRET-FLIMFluorescent ProteinDonor-acceptor PairCell SynchronizationMicroscopyLifetime MappingMitotic Spindle

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/61611?article_type=v

Combining QD-FRET and Microfluidics to Monitor DNA Nanocomplex Self-Assembly in Real-Time
check_url/pt/61611?article_type=v

Overvåking Kinase og fosfatase Aktiviteter Gjennom Cell Cycle av Ratiometric FRET
check_url/pt/61611?article_type=v

Real-time overvåkning av Ligand-reseptor interaksjoner med Fluorescence Resonance Energy Transfer
check_url/pt/61611?article_type=v

FRET Mikroskopi for sanntids overvåking av signalanlegg hendelser i levende celler Bruke Unimolecular biosensorer
check_url/pt/61611?article_type=v

Autonomt Bioluminescent mammalieceller for Kontinuerlig og sanntids overvåking av Cytotoksisitet
check_url/pt/61611?article_type=v

Real-time Imaging av Enkelt Engineered RNA transkripsjoner i levende celler ved hjelp Proporsjonellekspansjon bimolekylære Beacons
check_url/pt/61611?article_type=v

Identifisering av kinase-substrat Pairs Bruke Høy throughput screening
check_url/pt/61611?article_type=v

Påvisning av Intracellulær Gene Expression i levende celler av Muse, Human og svinekjøtt Origin med fluoresens-merket Nanopartikler
check_url/pt/61611?article_type=v

G Protein-selektive GPCR conformations måles ved hjelp av FRET sensorer i en levende celle Suspension fluorometer analysen
check_url/pt/61611?article_type=v

Et grafisk brukergrensesnitt for programvareassistert sporing av proteinkonsentrasjon i dynamiske cellulære protrusjoner

Read Article