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Co-Translational Insertion of Membrane Proteins into Preformed Nanodiscs
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Co-translationale Insertion von Membranproteinen in vorgeformte Nanoscheiben

DOI:
10.3791/61844-v

•

08:24 min

•

November 19, 2020

•

, , ,
1Institute of Biophysical Chemistry,Goethe University Frankfurt

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
  • 02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
  • 03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
  • 04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
  • 06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
  • 07:40Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Die kotranslationale Insertion in vorgeformte Nanoscheiben ermöglicht es, zellfrei synthetisierte Membranproteine in definierten Lipidumgebungen ohne Kontakt mit Detergenzien zu untersuchen. Dieses Protokoll beschreibt die Vorbereitung wesentlicher Systemkomponenten und die kritischen Parameter zur Verbesserung der Expressionseffizienz und Probenqualität.

Tags

Co-translational InsertionMembrane ProteinsNanodiscDetergent-freeProtein FoldingLipid EffectsCell-free ExpressionMembrane Scaffold ProteinCell DisruptionDialysis

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