Journal
/
/
Membran Proteinlerinin Önceden Oluşturulmuş Nanodisklere Ko-Translasyonel Olarak Yerleştirilmesi
JoVE Journal
Bioquímica
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Bioquímica
Co-Translational Insertion of Membrane Proteins into Preformed Nanodiscs
DOI:

08:24 min

November 19, 2020

, , ,

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:45S30 Ribosomal Protein Lysate Preparation
  • 02:17Membrane Scaffold Protein 1E3D1 (MSP1E3D1) Nanodisc Assembly
  • 03:243-mL Continuous Exchange Cell-Free (CECF) Reaction Setup
  • 04:1060-Microliter CECF Reaction Setup
  • 06:07Results: Representative Preformed Nanodisc-Modified Membrane Protein Characterization
  • 07:40Conclusion

Summary

Tadução automática

Önceden oluşturulmuş nanodisklere birlikte translasyonel yerleştirme, tanımlanmış lipit ortamlarında deterjanlarla temas etmeden hücresiz sentezlenmiş membran proteinlerinin incelenmesini mümkün kılar. Bu protokol, temel sistem bileşenlerinin hazırlanmasını ve ifade verimliliğini ve numune kalitesini artırmak için kritik parametreleri açıklar.

Vídeos Relacionados

Read Article