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Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized Emission
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Valutazione delle interazioni proteiche nelle cellule vive con emissione sensibilizzata alla FRET

DOI:
10.3791/62241-v

•

09:15 min

•

April 22, 2021

•

, , , , ,
1Department of Biophysics and Cell Biology, Faculty of Medicine,University of Debrecen, 2Gynecologic Oncology Division,Stanford University School of Medicine

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 01:12Plasmid Construction
  • 01:52Cell Culture and Transfection
  • 02:41FRET Imaging
  • 05:42Image Analysis for Detecting Absolute FRET Efficiencies Using Donor Quenching and Sensitized Emission
  • 07:01Results: Quantification of FRET Images
  • 08:28Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Il trasferimento di energia di risonanza di Förster (FRET) tra due molecole di fluorofori può essere utilizzato per studiare le interazioni proteiche nella cellula vivente. Qui, viene fornito un protocollo su come misurare la FRET nelle cellule vive rilevando l'emissione sensibilizzata dell'accettore e la tempra della molecola donatrice utilizzando la microscopia a scansione laser confocale.

Tags

Keywords: FRETFRET-sensitized EmissionProtein InteractionsLive-cell ImagingDonor QuenchingAcceptor Sensitized EmissionCrosstalkFluorescent ProteinsDetection EfficiencyDonor-acceptor Fusion ProteinEGFP-mCherryCell TransfectionConfocal MicroscopyEnvironmental Chamber

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