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Détermination de l’interaction tripartite entre deux monomères d’un facteur de transcription MADS-box et d’une protéine de capteur de calcium par essai BiFC-FRET-FLIM
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Determination of Tripartite Interaction between Two Monomers of a MADS-box Transcription Factor and a Calcium Sensor Protein by BiFC-FRET-FLIM Assay
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Détermination de l’interaction tripartite entre deux monomères d’un facteur de transcription MADS-box et d’une protéine de capteur de calcium par essai BiFC-FRET-FLIM

DOI:
10.3791/62791-v

•

14:34 min

•

December 25, 2021

•

, , , , , , ,
1Interdisciplinary Centre for Plant Genomics, Department of Plant Molecular Biology,University of Delhi South Campus, 2University School of Biotechnology,Guru Gobind Singh Indraprastha University

Capítulos

  • 00:08Introduction
  • 01:17Cloning of Genes in Entry and Destination Vectors
  • 02:01Growth Conditions for Nicotiana benthamiana Plants
  • 03:05Prepare Bacterial Strains for Agroinfiltration
  • 06:20Prepare Slides for Fluorescence Visualization
  • 06:45Fret-Flim Analysis Using a Confocal Laser Scanning Microscope
  • 10:51Fret-Flim Analysis Using a Confocal Laser Scanning Microscope: The Tripartite Interaction
  • 12:31Representative Results
  • 13:42Conclusion

Summary

Tadução automática

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Nous présentons ici une méthode pour visualiser la formation de complexes ternaires entre trois partenaires protéiques à l’aide de protéines marquées par fluorescence par le test FRET-FLIM basé sur BiFC. Cette méthode est précieuse pour étudier les complexes d’interaction protéine-protéine in vivo.

Tags

Protein-protein InteractionsBiFCFRETFLIMTripartite InteractionMADS-box Transcription FactorCalcium Sensor ProteinHomodimerizationNicotiana BenthamianaAgroinfiltration

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