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Determinación de la interacción tripartita entre dos monómeros de un factor de transcripción MADS-box y una proteína sensora de calcio mediante ensayo BiFC-FRET-FLIM
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Determination of Tripartite Interaction between Two Monomers of a MADS-box Transcription Factor and a Calcium Sensor Protein by BiFC-FRET-FLIM Assay
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Determinación de la interacción tripartita entre dos monómeros de un factor de transcripción MADS-box y una proteína sensora de calcio mediante ensayo BiFC-FRET-FLIM

DOI:
10.3791/62791-v

•

14:34 min

•

December 25, 2021

•

, , , , , , ,
1Interdisciplinary Centre for Plant Genomics, Department of Plant Molecular Biology,University of Delhi South Campus, 2University School of Biotechnology,Guru Gobind Singh Indraprastha University

Capítulos

  • 00:08Introduction
  • 01:17Cloning of Genes in Entry and Destination Vectors
  • 02:01Growth Conditions for Nicotiana benthamiana Plants
  • 03:05Prepare Bacterial Strains for Agroinfiltration
  • 06:20Prepare Slides for Fluorescence Visualization
  • 06:45Fret-Flim Analysis Using a Confocal Laser Scanning Microscope
  • 10:51Fret-Flim Analysis Using a Confocal Laser Scanning Microscope: The Tripartite Interaction
  • 12:31Representative Results
  • 13:42Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aquí presentamos, un método para visualizar la formación de complejos ternarios entre tres socios de proteínas utilizando proteínas marcadas con fluorescentes mediante el ensayo FRET-FLIM basado en BiFC. Este método es valioso para estudiar los complejos de interacción proteína-proteína in vivo.

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Keywords: Protein-protein InteractionsBiFCFRETFLIMTripartite InteractionMADS-box Transcription FactorCalcium Sensor ProteinHomodimerizationNicotiana BenthamianaAgroinfiltration

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