Journal
/
Bioquímica
/
Amélioration de la relaxation paramagnétique pour détecter et caractériser des auto-associations de protéines intrinsèquement désordonnées
JoVE Journal
Bioquímica
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Bioquímica
Paramagnetic Relaxation Enhancement for Detecting and Characterizing Self-Associations of Intrinsically Disordered Proteins
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Amélioration de la relaxation paramagnétique pour détecter et caractériser des auto-associations de protéines intrinsèquement désordonnées

DOI:
10.3791/63057-v

•

07:24 min

•

September 23, 2021

•

,
1Department of Biochemistry and Structural Biology and Greehey Children’s Cancer Research Institute,The University of Texas Health Science Center at San Antonio

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:49Conjugating the 3-Maleimido-PROXYL Nitroxide Spin Label
  • 01:38Preparing the NMR Sample for Measuring Intramolecular PRE
  • 02:11Setting Up the NMR Spectrometer and Experiment Specific Parameters
  • 03:51Setting Up the 1HN–T2 Experiment
  • 04:58Making a Diamagnetic Sample by Reducing Spin-Label with Ascorbic Acid
  • 05:52Results: 1HN–T2 Rates for Residues 171 – 264 of the Intrinsically Disordered Domain of EWSR1
  • 06:30Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Un protocole pour l’application de la spectroscopie RMN d’amélioration de la relaxation paramagnétique pour détecter les interactions inter- et intramoléculaires faibles et transitoires dans les protéines intrinsèquement désordonnées est présenté.

Tags

Keywords: Paramagnetic Relaxation EnhancementIntrinsically Disordered ProteinsBiomolecular InteractionsNMR TechniquesSpin Label15N Isotopically Labeled ProteinGel FiltrationEllman’s ReagentNMR Sample PreparationPulse Calibration

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/63057?article_type=v

Spectroscopie par résonance magnétique nucléaire pour l'identification des phosphorylations multiples de protéines intrinsèquement désordonnées
check_url/pt/63057?article_type=v

Utilisation de résonance paramagnétique électronique dans des échantillons biologiques à température ambiante et à 77 K
check_url/pt/63057?article_type=v

Fluorescent coloration à l’argent des protéines dans les Gels de Polyacrylamide
check_url/pt/63057?article_type=v

Expression, Purification, Cristallisation et Essais enzymatiques des protéines contenant du domaine de l'hydrolase fumarylacetoacetate
check_url/pt/63057?article_type=v

Caractérisation des agrégats de protéines individuels par nanospectroscopie infrarouge et microscopie de force atomique
check_url/pt/63057?article_type=v

KRAS4b recombinant entièrement transformé : Isoler et caractériser les protéines farnestées et méthylées
check_url/pt/63057?article_type=v

Caractériser les protéines cellulaires avec l’oxydation photochimique rapide à cellule des protéines
check_url/pt/63057?article_type=v

Sectionnement transversal du riz mature (Oryza sativa L.) Noyaux pour l’imagerie par microscopie électronique à balayage à l’aide d’embouts de pipette comme support d’immobilisation
check_url/pt/63057?article_type=v

15 ans N CPMG Relaxation Dispersion for the Investigation of Protein Conformational Dynamics on the μs-ms Timescale
check_url/pt/63057?article_type=v

Aspects pratiques de la préparation des échantillons et de la configuration des expériences de dispersion de relaxation 1H R1ρ de l’ARN

Read Article