Journal
/
Bioquímica
/
İçsel Olarak Düzensiz Proteinlerin Kendi Kendine İlişkilerini Tespit Etmek ve Karakterize Etmek için Paramanyetik Gevşeme Geliştirmesi
JoVE Journal
Bioquímica
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Bioquímica
Paramagnetic Relaxation Enhancement for Detecting and Characterizing Self-Associations of Intrinsically Disordered Proteins
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

İçsel Olarak Düzensiz Proteinlerin Kendi Kendine İlişkilerini Tespit Etmek ve Karakterize Etmek için Paramanyetik Gevşeme Geliştirmesi

DOI:
10.3791/63057-v

•

07:24 min

•

September 23, 2021

•

,
1Department of Biochemistry and Structural Biology and Greehey Children’s Cancer Research Institute,The University of Texas Health Science Center at San Antonio

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:49Conjugating the 3-Maleimido-PROXYL Nitroxide Spin Label
  • 01:38Preparing the NMR Sample for Measuring Intramolecular PRE
  • 02:11Setting Up the NMR Spectrometer and Experiment Specific Parameters
  • 03:51Setting Up the 1HN–T2 Experiment
  • 04:58Making a Diamagnetic Sample by Reducing Spin-Label with Ascorbic Acid
  • 05:52Results: 1HN–T2 Rates for Residues 171 – 264 of the Intrinsically Disordered Domain of EWSR1
  • 06:30Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Doğası gereği düzensiz proteinlerde zayıf ve geçici moleküller arası ve moleküller arası etkileşimleri tespit etmek için paramanyetik gevşeme geliştirme NMR spektroskopisinin uygulanması için bir protokol sunulmaktadır.

Tags

Paramagnetic Relaxation EnhancementIntrinsically Disordered ProteinsBiomolecular InteractionsNMR TechniquesSpin Label15N Isotopically Labeled ProteinGel FiltrationEllman’s ReagentNMR Sample PreparationPulse Calibration

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

Özünde Düzensiz Proteinlerin Çoklu fosforilasyon Saptanma Nükleer Manyetik Rezonans Spektroskopisi

Elektron Paramagnetic rezonans ortam sıcaklığı ve 77 K biyolojik örneklerde kullanımı

Floresan gümüş Polyacrylamide jeller proteinlerin boyama

Fumarylacetoasetat Hydrolase etki alanı Içeren proteinleri ifade, arıtma, kristalizasyon ve enzim Asdimleri

Bireysel Protein Agregalarının Kızılötesi Nanospektroskopi ve Atomik Kuvvet Mikroskobu ile Karakterizeleştirilmesi

Tam İşlenmiş Rekombinant KRAS4b: Farnesile ve Metillenmiş Proteini Yalıtma ve Karakterize Etme

Hücre İçi Hızlı Fotokimyasal Oksidasyon ile Hücresel Proteinlerin Karakterizasyonu

Olgun Pirincin Enine Kesiti (Oryza sativa L.) Hareketsizleştirme Desteği Olarak Pipet İpuçlarını Kullanarak Elektron Mikroskopi Görüntülemesini Taramak için Çekirdekler

15 μs-ms Zaman Ölçeğinde Protein Konformasyonsal Dinamiklerinin Araştırılması için N CPMG Gevşeme Dağılımı

RNA'nın 1 H R1φ Gevşeme Dispersiyon Deneylerinin Numune Hazırlama ve Kurulumunun Pratik Yönleri

Read Article