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アフィニティークロマトグラフィーを用いたヒトマトリックスメタロプロテイナーゼ-3の細菌発現と精製

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Bacterial Expression and Purification of Human Matrix Metalloproteinase-3 using Affinity Chromatography

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アフィニティークロマトグラフィーを用いたヒトマトリックスメタロプロテイナーゼ-3の細菌発現と精製

DOI:

10.3791/63263-v

•

07:32 min

•

March 30, 2022

•

Alexander J. Bolt*¹, Linh D. Do*¹, Maryam Raeeszadeh-Sarmazdeh

¹Department of Chemical & Materials Engineering,University of Nevada, Reno

Capítulos

00:04Introduction
00:52MMP Expression
03:46MMP Purification
04:27MMP Refolding
05:12MMP Activation
05:46Results: Purification and Activation of Hisx6-Pro-MMP-3cd From BL21(DE3) and R2DP Cells
06:38Conclusion

Summary

Tadução automática

hisタグの精製、透析、および活性化は、細菌における可溶性で活性なマトリックスメタロプロテイナーゼ-3触媒ドメインタンパク質発現の収率を増加させるために用いられる。タンパク質画分は、SDS-PAGEゲルを介して分析される。

Tags

Keywords: Bacterial Expression Recombinant MMP-3 Affinity Chromatography E. Coli R2DP Cell Strain MMP Inhibitors Protein Purification Protein Folding Post-translational Processing IPTG Induction Cell Lysis Inclusion Body Solubilization Sonication Centrifugation

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