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哺乳類細胞からのユビキチン化p53タンパク質の精製
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Purification of Ubiquitinated p53 Proteins from Mammalian Cells
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哺乳類細胞からのユビキチン化p53タンパク質の精製

DOI:
10.3791/63602-v

•

10:55 min

•

March 21, 2022

•

, ,
1Center for Translational Medicine,The Affiliated Zhangjiagang Hospital of Soochow University

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:43Plasmid Transfection
  • 02:16Cell Collection
  • 02:52Purification of Ubiquitinated Proteins under Nondenaturing Conditions
  • 05:01Purification of Ubiquitinated Proteins under Denaturing Conditions
  • 07:49Detection of Purified Ubiquitinated Proteins by Western Blotting
  • 08:29Results: Ubiquitinated p53 Proteins Purified under Nondenaturing and Denaturing Conditions
  • 10:22Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

このプロトコルは、例としてp53腫瘍抑制タンパク質を使用して哺乳動物細胞からユビキチン化タンパク質を精製するための段階的な方法を記載している。ユビキチン化p53タンパク質を、ストリンジェントな非変性および変性条件下で細胞から精製した。

Tags

Ubiquitinated P53Protein PurificationMammalian CellsUbiquitinationLiposome TransfectionMG132FLAG Lysis BufferProtease Inhibitor

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