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In Vitro Apical-Out Enteroid Model of Necrotizing Enterocolitis

In vitro Modelo enteróide apical-out de enterocolite necrotizante

DOI:
10.3791/64003-v

•

09:11 min

•

June 08, 2022

•

, ,
1Department of Pediatrics, Division of Neonatal-Perinatal Medicine,University of Oklahoma Health Sciences Center and Center for Pregnancy and Newborn Health

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:58Establishment of Apical-Out Enteroid Necrotizing Enterocolitis (NEC)-in-a-Dish Model
  • 02:44Immunofluorescence Staining and Confocal Microscopy
  • 05:52Apical-Out NEC-in-a-Dish Cell Viability
  • 07:01Results: Establishment of Apical-Out NEC in-a-Dish Model and Assessing Viability of Enteroids
  • 08:28Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Este protocolo descreve um modelo de enterocolite necrosante a apical (NEC)-in-a-dish utilizando pequenos enteróides intestinais com polaridade invertida, permitindo o acesso à superfície apical. Fornecemos um protocolo de coloração imunofluorescente para detectar interrupção epitelial relacionada à NEC e um método para determinar a viabilidade de enteróides apical-out submetidos ao protocolo NEC-in-a-dish.

Tags

In VitroApical-out Enteroid ModelNecrotizing EnterocolitisIntestinal InflammationPolarity Reversal3D EnteroidsEDTAPBSDMEM F12Antibiotic-free MediumUltra-low Attachment PlateFixativeTriton X-100

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