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Visualizando a dinâmica de acoplamento de actina e microtúbula in vitro por microscopia de fluorescência interna total (TIRF)
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JoVE Journal Bioquímica
Visualizing Actin and Microtubule Coupling Dynamics In Vitro by Total Internal Reflection Fluorescence (TIRF) Microscopy

Visualizando a dinâmica de acoplamento de actina e microtúbula in vitro por microscopia de fluorescência interna total (TIRF)

DOI:
10.3791/64074-v

•

08:44 min

•

July 20, 2022

•

1Department of Biochemistry & Molecular Biology, and Department of Neuroscience & Physiology,State University of New York (SUNY) Upstate Medical University

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:40Coating Cleaned Coverslips with mPEG- and Biotin-PEG-Silane
  • 01:21Assembling Imaging Flow Chambers
  • 02:50Conditioning of Perfusion Chambers
  • 03:47Microscope Preparation
  • 04:40Preparation of Protein Reaction Mixes
  • 06:02Image Actin and Microtubule Dynamics
  • 06:43Results: Example Measurements of Microtubules and Actin Filament Dynamics
  • 08:14Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Este protocolo é um guia para visualizar actina dinâmica e microtúbulos usando um ensaio de microscopia de fluorescência interna total in vitro (TIRF).

Tags

ActinMicrotubuleTIRF MicroscopyPEG-SilaneBiotin-PEG-SilaneCover SlipImaging ChamberEpoxy ResinPerfusion ChamberConditioning SolutionsTotal Internal Reflection Fluorescence

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