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Ensaio Pulldown Juntamente com Co-Expressão em Células de Bactérias como uma Ferramenta Eficiente em Tempo para Testar Interações Desafiadoras Proteína-Proteína
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JoVE Journal Bioquímica
Pulldown Assay Coupled with Co-Expression in Bacteria Cells as a Time-Efficient Tool for Testing Challenging Protein-Protein Interactions

Ensaio Pulldown Juntamente com Co-Expressão em Células de Bactérias como uma Ferramenta Eficiente em Tempo para Testar Interações Desafiadoras Proteína-Proteína

DOI:
10.3791/64541-v

•

07:03 min

•

December 23, 2022

•

, , , ,
1Department of the Control of Genetic Processes, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences, 2Center for Precision Genome Editing and Genetic Technologies for Biomedicine, Institute of Gene Biology,Russian Academy of Sciences

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:56Co-Transformation of Escherichia coli
  • 02:18Expression
  • 03:21Pulldown Assay
  • 04:52Results: Bacterial Co-Expression of Differentially Tagged Proteins
  • 06:15Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aqui, descrevemos um método para a co-expressão bacteriana de proteínas diferencialmente marcadas usando um conjunto de vetores compatíveis, seguido pelas técnicas convencionais de pulldown para estudar complexos proteicos que não podem se montar in vitro.

Tags

Keywords: Pulldown AssayProtein-protein InteractionsCo-expressionHeterodimersProtein Complex AssemblyExpression OptimizationRapid ScreeningEscherichia ColiBacterial TransformationIPTG InductionCell LysisAffinity Purification

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