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Ex Vivo Expansão e Manipulação Genética de Células-Tronco Hematopoéticas de Camundongos em Culturas à Base de Álcool Polivinílico
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Ex Vivo Expansion and Genetic Manipulation of Mouse Hematopoietic Stem Cells in Polyvinyl Alcohol-Based Cultures

Ex Vivo Expansão e Manipulação Genética de Células-Tronco Hematopoéticas de Camundongos em Culturas à Base de Álcool Polivinílico

DOI:
10.3791/64791-v

•

07:55 min

•

February 10, 2023

•

, ,
1MRC Weatherall Institute of Molecular Medicine,University of Oxford

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 01:05Bone Marrow Extraction and c-Kit&#43 Enrichment of Hematopoietic Stem Cell &#40HSC&#41
  • 03:03Initiating Cell Cultures with c-Kit-Enriched Hematopoietic Stem and Progenitor Cells &#40HSPCs&#41
  • 03:45Performing Media Changes
  • 04:19Electroporating Cultured HSPCs
  • 05:24Transducing Cultured HSPCs with Lentiviral Vector
  • 06:17Results: Fluorescence-Activated Cell Sorting &#40FACS&#41 of the c-Kit-Enriched HSCs
  • 07:22Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Apresentamos aqui um protocolo para iniciar, manter e analisar culturas de células-tronco hematopoéticas de camundongos usando expansão ex vivo à base de álcool polivinílico, bem como métodos para manipulá-las geneticamente por transdução lentiviral e eletroporação.

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Hematopoietic Stem CellsEx Vivo ExpansionGenetic ManipulationPolyvinyl AlcoholMouseBone MarrowC-KitMagnetic Column SeparationCell Culture

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