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7.12:

Transposons de DNA

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Molecular Biology
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JoVE Core Molecular Biology
DNA-only Transposons

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Transcosões pode ser encontrado em ambos os procariotas e eucariotas, respondendo por 5%do genoma da ameba, 00:00:07.650 00:00:13.290 44%do genoma humano e até 90%do genoma humano. Há muitos tipos diferentes de transposões, mas podem ser caracterizados extensamente em duas classes distintas 1 e 2 Transposões de Classe 1, também conhecidos como retrotransposões, exigem a transcrição de um RNA intermediário em DNA antes de serem inseridos em seu alvo. No entanto, transposões Classe 2, ou transposões de apenas DNA, permanecem na forma de DNA durante toda a transposição.Eles contêm também um gene que codifica uma enzima multifuncional chamada transposase. O gene da transposase é ladeado por repetições invertidas terminais, que são de fita-simples, com cerca de nove a 40 pares base de comprimento, e complementos inversos um do outro. Durante a transposição de corta-e-cola, o gene expressa dois monômeros da enzima transposase, que ligam ao terminal invertem as repetições.Quando os monômeros dimerizam, juntam-se as duas. repetições invertidas. Isto cria um complexo de proteína de DNA estável chamado complexo sináptico, ou um transsossomo.Em seguida, o transsossomo cliva as vertentes do DNA em cada fim do transposão, deixando para trás as sequências chamadas repetições diretas. Isto libera o transposão do DNA do doador, e que agora é livre para ser transportado a um alvo aleatório. Para inserção, a transposase faz dois cortes escalonados no DNA alvo por clivagem dos laços do fosfodiéster.As vertentes cortadas do DNA alvo são puxadas para fora para criar uma lacuna com fita-simples pendentes. Agora, a extremidade 3 prime OH do DNA do transposão reage com o 5 prime terminal do DNA alvo, deixando as lacunas entre os 5 prime terminais do transposão 00:02:01.940 00:02 04.800 e o 3 prime alvo. A DNA polimerase usa a lacuna da extremidade 3 prime como um primer e preenche a lacuna em um processo chamado duplicação do local do alvo.O DNA recém-sintetizado e o transposão são unidos pela ligase do DNA. tal inserção pode ter possíveis efeitos significativos. Em alguns casos, pode ligar ou desligar o gene alvo fornecendo promotores de ligação ou isoladores codificados pelo transposão.Alternativamente, pode também alterar a função do gene perturbando a quebra normal da exão durante a geração do mRNA. Por exemplo, isto pode acontecer se um transposão contendo um novo local da junção salta em um gene existente e rearranja os sinais transcricionais, resultando na criação de um RNA aberrante.

7.12:

Transposons de DNA

Os transposões só de DNA são chamados de transposões autónomos, uma vez que codificam para a enzima transposase necessária para o mecanismo de transposição. A inserção de transposões pode alterar as funções de genes de várias maneiras. Podem mutar o gene, alterar a expressão do gene introduzindo uma nova sequência promotora ou isoladora, introduzir novos locais de splicing, e alterar os transcriptos de mRNA produzidos, ou remodelar a estrutura da cromatina.

O local dador de onde o transposão é excisado é degradado ou reparado. Métodos de reparação imprecisos não restauram o dador para a sua sequência original, alterando muitas vezes inadvertidamente o seu fenótipo.

A excisão imperfeita de elementos transponíveis conduz a que partes de sequências genómicas sejam transportadas com o transposão. Isto resulta em um fenómeno chamado mistura de exões, onde dois exões não relacionados são posicionados adjacentes um ao outro, resultando em novas estruturas de genes. Assim, a transposição pode não só mover genes, como também pode reorganizar elementos genéticos não móveis.

Após inserção no local de destino, os transposões podem alterar a atividade dos elementos genéticos hospedeiros. Isto torna os transposões de DNA em ferramentas poderosas na edição do genoma. Na transgénese, transposões de DNA sintéticos são usados como veículos de genes para estudar os efeitos de DNA estranho no organismo hospedeiro. Um transposão de DNA sintético amplamente utilizado é o transposão da Bela adormecida que é inserido nos genomas de diferentes espécies que vão desde protozoários a pequenos vertebrados, como peixes, rãs, e ratos, para introduzir novas características ou descobrir novos genes.

Suggested Reading

  1. Pray, Leslie A. "Transposons: The jumping genes." Nature education 1, no. 1 (2008): 204.
  2. Kazazian, Haig H. "Mobile elements: drivers of genome evolution." science 303, no. 5664 (2004): 1626-1632.
  3. Zeng, Lu, Stephen M. Pederson, R. Daniel Kortschak, and David L. Adelson. "Transposable elements and gene expression during the evolution of amniotes." Mobile DNA 9, no. 1 (2018): 17.
  4. Muñoz-López, Martín, and José L. García-Pérez. "DNA transposons: nature and applications in genomics." Current genomics 11, no. 2 (2010): 115-128.