单侧后肢缺血诱导的外科手术,激光多普勒血流灌注显像缺血确认证明。
在美国,周围动脉疾病(PAD)影响约10万个人,是全世界也普遍存在。为缓解症状的药物治疗是有限的。手术或血管内介入一些个人是有用的,但长期的结果往往令人失望。因此,有需要开发新的疗法来治疗PAD。小鼠后肢缺血准备的PAD的典范,是用于测试新疗法。当相比,其他车型的组织缺血,如冠状动脉或脑动脉结扎,结扎股动脉提供了一个简单的模型缺血组织。这个模型的其他优点是易于访问股动脉和低死亡率。
在这段视频中,我们展示了单方面hindimb缺血小鼠模型的方法。将描述创建和评估模型的具体材料和程序,包括肢体灌注的激光多普勒成像技术评估。此协议也可以用于移植和非侵入性的细胞,这是由黄等证明。的跟踪。
有一些变异来源的考虑,同时规划和执行后肢缺血模型。首先,缺血的水平可能会有所不同,根据结扎偏科的位置。因此,动物模型的一致性,应接受动脉结扎的同一水平。缺血性恢复的变化的另一个来源是动物的年龄有关,与年轻的动物,具有更快和更完整的回收率比年长的动物(8-10个月大的)(6-8周龄),作为评估血流动力学(即激光多普勒血流灌注)或功能(如跑步机测试)的措施。其中之一是评估血管生成剂的研究,它可能是最好使用旧的动物,因为群体之间有较大的差异,可能与干预治疗观察。相反,研究,其中之一是评估一个抗血管生成的因素,它可能是可取的使用年轻的动物,最大限度地发挥规模效应3。
如果正确执行,应该有最小的并发症如出血,感染,或死亡率等。如果出血发生意外中断,通过股静脉或其他船只,适度的压力,用无菌棉放倒撒施或纱布,应适用于出血部位,直到出血停止。动物感染的迹象,应与抗感染药物治疗。动物表现出显着性坏疽可能需要beeuthanized。这种并发症是较常见的老年动物,并在某些菌株,如BALB C小鼠4。此外,后肢缺血模型可能会导致轻度至中度疼痛。因此,止痛药,如丁丙诺啡或卡洛芬应管理作为疼痛治疗的需要,根据IACUC的建议。
总之,我们已经证明了一个简单和可重复性的方法研究在小鼠后肢缺血模型的PAD。后肢缺血模型,用激光多普勒成像分析是一个优秀的系统,为研究血管病症和评估治疗候选人。
作者感谢安德烈阿克斯特尔,伊藤聪,MD,杰夫Velotta,医学博士,格兰特霍伊特,罗伯特C ·罗宾斯博士,金钰,医学博士,添多伊尔,博士和斯坦福大学的小动物成像核心技术援助。作者还感谢支持兽医设备AM比克福德公司。支持这项研究是由美国国立卫生研究院的研究补助金(R01 HL – 75774,R01,R21 HL085743,CA098303 1K12 HL087746),加利福尼亚州烟草相关疾病的研究计划的加州大学(15IT – 0257和1514RT – 0169) ,并为加州再生医学(RS1 – 00183)研究所。新罕布什尔州是支持由美国心脏协会的奖学金。