सेल बायोलॉजी के लिए प्रोटीन के microcontact मुद्रण
Summary
Microcontact मुद्रण सामग्री सतहों पर बड़े पैमाने पर पैटर्न प्रोटीन और अन्य अणुओं के लिए प्रयोग किया जाता है. हम इस प्रक्रिया के बुनियादी कदम का प्रदर्शन, कांच पर fibronectin के पैटर्न मुद्रांकन.
Abstract
substrates पर पैटर्न प्रोटीन और अन्य biomolecules करने की क्षमता बाह्य वातावरण के स्थानिक जटिलता पर कब्जा करने के लिए महत्वपूर्ण है. Microcontact मुद्रण के विकास Whitesides समूह द्वारा (<a href="http://gmwgroup.harvard.edu/"> Http://gmwgroup.harvard.edu/</a)> 1990 के दशक के मध्य में माइक्रोइलेक्ट्रॉनिक / microfabrication तकनीक पर ध्यान केंद्रित जीवन विज्ञान प्रयोगशालाओं को सुलभ बनाने के द्वारा इस क्षेत्र revolutionalized. इस पद्धति का प्रारंभिक कार्यान्वयन polydimethylsiloxane टिकटों (PDMS) सामग्री सतहों पर functionalized रसायनों के पैटर्न बनाने के लिए इस्तेमाल किया<sup> 1</sup>. तब से, नवीन दृष्टिकोण की एक सीमा पैटर्न अन्य अणुओं के लिए विकसित किया गया है प्रोटीन सहित,<sup2></sup>. यह वीडियो PDMS टिकटें बनाने की बुनियादी प्रक्रिया को दर्शाता है और उन्हें प्रोटीन पैटर्न का उपयोग करता है, के रूप में इन कदमों के लिए सही शब्दों में व्यक्त करने के लिए मुश्किल हैं. हम patterning की एक विशिष्ट उदाहरण के रूप में गिलास coverslips पर बाह्य मैट्रिक्स प्रोटीन fibronectin patterning पर ध्यान केंद्रित. Microcontact मुद्रण प्रक्रिया का एक महत्वपूर्ण घटक एक topological मास्टर, जिसमें से टिकटों में डाल रहे हैं है, गुरु के क्षेत्रों उठाया और कम स्टांप में नजर आता हैं और अंतिम पैटर्न को परिभाषित. आमतौर पर, एक मास्टर एक सिलिकॉन वफ़र photoresist के साथ लेपित है और फिर photolithography द्वारा नमूनों के होते हैं किया है, यहाँ के रूप में. एक विशिष्ट पैटर्न युक्त स्वामी के निर्माण में विशेष उपकरणों की आवश्यकता है, और है सबसे अच्छा एक निर्माण केंद्र या सुविधा के साथ परामर्श में संपर्क है. हालांकि, टोपोलॉजी के साथ लगभग किसी भी सब्सट्रेट प्लास्टिक विवर्तन gratings के रूप में एक मास्टर (एक उदाहरण के लिए अभिकर्मकों देखें) के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है, और ऐसे serendipitous स्वामी आसानी से उपलब्ध, सरल पैटर्न प्रदान. इस प्रोटोकॉल के हाथ में एक मास्टर होने के बिंदु पर शुरू होता है.
Protocol
Discussion
microcontact मुद्रण प्रक्रिया अवधारणात्मक सरल और बहुत मजबूत है, अणुओं की एक विस्तृत श्रृंखला के substrates के एक किस्म पर patterning के लिए लागू किया गया. हालांकि, इस प्रक्रिया एक कला के बारे में कुछ रहता है. पैटर्न के विशिष्ट ज्याम?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Plasma Cleaner | Harrick Scientific Products, Inc. | PDC-32G | ||
| Desiccator | Nalgene | 5315-0150 | ||
| PBS | Reagent | Invitrogen | 10010-072 | |
| Protein labeling kit | Reagent | Invitrogen | A30006 | |
| Fibronectin | Reagent | Sigma-Aldrich | F2006 | |
| Staining rack | Reagent | Thomas Scientific | 8542E40 | |
| Coverslips | Reagent | Fisher Scientific | 12-544-12 | |
| Sylgard 184 | Reagent | Ellsworth Adhesives | 184 Sil Elast Kit | |
| Diffraction Grating | Reagent | Edmund Scientific | 3040267 |
References
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