Summary

组织特异性的伤害性和炎症介质的测量人体内生物活性测定

Published: December 01, 2008
doi:

Summary

一个方法是为调解疼痛和炎症的生化物质的测量(在这里,实验发炎的皮肤)的相关组织网站的间质液样品在体内收集。

Abstract

这在人体内生物活性,可用于研究人类的志愿者和患者身上。样品收集相关组织的网站,如通过无菌插入微透析导管(皮肤透析,德国埃尔兰根)皮肤。这个例子说明的是收集实验发炎的皮肤在人类志愿者的组织间液。可以结合其他实验测试样品的采集。例如,当地公布的生物化学和主观实验发炎的皮肤疼痛刺激的敏感性的同时评估提供了关键的生化行为的环节,以确定疼痛和炎症的生物标志物。机械洞察生活的人的机体检测允许特定组织底层的疼痛和/或炎症过程。该方法也适合于研究现有的或新的干预措施的有效性 – 目标的痛苦和/或炎症性疾病的治疗 – 如新的候选药物。本文将收集人类研究对象的实验发炎的患处皮肤组织间液微透析技术的使用提供了详细的说明。通常处理多重珠阵列,使体积小50微升样品化验100分析物免疫援助组织间液样本。

Protocol

诱导实验性炎症: 第一度晒伤引起的非皮肤晒黑了一个校准,紫外线B的源(Saalmann万用表SBB的LT 499,Saalmann有限责任公司,禧福,德国)的援助大腿。晒伤是一个微透析实验开始前三次运用必要的紫外线光量,导致完成泛红裸露的皮肤,或3倍最小红斑剂量(MED)诱导24小时。 MED是在研究开始之前,每个主题确定。准确地传递是有保证的能源与紫外线米Grobel紫外线博士电子公司,埃特林根?…

Discussion

微透析技术和多重免疫检测技术的结合使用,是一个宝贵的实时,人体内生物活性提供利益的组织的生化事件的洞察力。结合行为测试,如疼痛测试,该方法允许调解疼痛和炎症的生化物质之间复杂的相互作用研究。有前途的方法是1)确定组织特定的生物标志物介导的疼痛和炎症,2)提供到与周围组织的病变炎症和慢性疼痛的条件的病理机理的认识,以及3)探索镇痛/反hyperalgesic和抗炎行动新的候选药物和介入…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Microdialysis catheter Tool Dermal Dialysis NA  
Pump 22 Tool Harvard Apparatus 552219  
Saalmann Multitester SBB LT 400 Tool Saalmann GmbH NA  
RM-12 IP-65 Radiometer Tool Dr. Grobel UV Elektronik GmbH 82120000/81112100  
Complete Proteinase Inhibitor Reagent Roche Bioscience 11836145001  
Microcent tube Tool E&K Scientific 380150-X  
Albumin 5% Reagent ZLB Behring NA  
Lactated Ringer Reagent Hospira Inc NA  
Xylocaine-MPF Other Astra Zeneca NA  
Syringe 1mL Tool Becton Dickinson Co 309602  

References

  1. Angst, M. S., Clark, J. D., Carvalho, B., Tingle, M., Schmelz, M., Yeomans, D. C. Cytokine profile in human skin in response to experimental inflammation, noxious stimulation and administration of a COX-inhibitor: A microdialysis study. Pain. 139, 15-27 (2008).
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Cite This Article
Angst, M. S., Tingle, M., Schmelz, M., Carvalho, B., Yeomans, D. C. Human In-Vivo Bioassay for the Tissue-Specific Measurement of Nociceptive and Inflammatory Mediators. J. Vis. Exp. (22), e1074, doi:10.3791/1074 (2008).

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