Una técnica se presenta para la colección en vivo de las muestras de líquido intersticial del tejido de los sitios pertinentes (la piel aquí, experimentalmente inflamación) para la medición de sustancias bioquímicas mediar el dolor y la inflamación.
Abstract
Este bioensayo humana in vivo puede ser utilizado para estudiar voluntarios y pacientes. Las muestras se recogen de los sitios de los tejidos pertinentes, tales como la piel a través de catéteres de microdiálisis asépticamente insertado (diálisis dérmica, Erlangen, Alemania). Muestra en este ejemplo es la colección de líquido intersticial de la piel inflamada forma experimental en voluntarios humanos. La recogida de muestras se puede combinar con otras pruebas experimentales. Por ejemplo, la evaluación simultánea de productos bioquímicos liberados localmente y la sensibilidad subjetiva a los estímulos dolorosos en la piel inflamada experimental proporciona la crítica bioquímicos-conductual enlace para identificar biomarcadores de inflamación y dolor. Ensayo presentado en el organismo humano vivo permite visión mecanicista de los procesos específicos de tejido subyacente del dolor y / o la inflamación. El método también es adecuado para examinar la efectividad de las intervenciones existentes o nuevas – tales como los nuevos medicamentos – objetivo el tratamiento de dolor y / o inflamatorios. En este artículo se proporcionará una descripción detallada sobre el uso de técnicas de microdiálisis para recoger el líquido intersticial de la lesión de la piel inflamada forma experimental los sujetos de estudio humanos. Muestras de fluido intersticial son procesados con la ayuda de los inmunoensayos multiplex serie de cuentas que permite ensayar hasta 100 analitos en muestras tan pequeñas como en el volumen de 50 microlitros.
Protocol
La inducción de la inflamación experimental: Una quemadura de primer grado se induce en la piel no curtida de un muslo con ayuda de un calibrado, la fuente de los rayos ultravioleta B (Saalmann Multitester SBB LT 499, Saalmann GmbH, Hereford, Alemania). La quemadura solar es inducida por 24 horas antes de iniciar un experimento de microdiálisis mediante la aplicación de tres veces la cantidad de luz UVB necesaria para causar enrojecimiento completa de la piel expuesta, o tres veces la dosis mínima de eri…
Discussion
El uso combinado de técnicas de microdiálisis y la tecnología de inmunoanálisis multiplex es un valor en tiempo real, en vivo bioensayo humanos proporcionando información sobre los eventos bioquímicos en el tejido de interés. En combinación con las pruebas de comportamiento, tales como pruebas de dolor, el método permite el estudio de las complejas interacciones bioquímicas de la mediación del dolor y la inflamación. El método es prometedor para 1) la identificación de biomarcadores específicos de tejido mediar el dolor y la …
Angst, M. S., Tingle, M., Schmelz, M., Carvalho, B., Yeomans, D. C. Human In-Vivo Bioassay for the Tissue-Specific Measurement of Nociceptive and Inflammatory Mediators. J. Vis. Exp. (22), e1074, doi:10.3791/1074 (2008).