قياس انواع معينة ايليجانس سبان الحياة على وسائل الاعلام الصلبة
Summary
في هذا المقال نقدم بروتوكول عام لقياس مدى الحياة من الديدان الخيطية حافظت على وسائل الإعلام متينة مع الأشعة فوق البنفسجية قتل الغذائي الجرثومي.
Abstract
الشيخوخة هي عملية التنكسية يتميز التدهور التدريجي لمكونات العضيات الخلوية ويؤدي إلى الوفاة. والدودة الخيطية<em> انواع معينة ايليجانس</em> برز كنموذج الرئيسية المستخدمة لدراسة بيولوجيا الشيخوخة. لأن تقريبا كل نظام فرعي يخضع لانخفاض البيولوجية الوظيفية مع زيادة العمر ، تمتد الحياة هو نقطة النهاية الرئيسي للفائدة عند النظر في المعدل الإجمالي للشيخوخة. في الديدان الخيطية ، ويعرف عادة مدى الحياة على اعتبار أن عدد أيام حيوان يبقى استجابة للمؤثرات الخارجية. الديدان الخيطية يمكن نشر في وسائل الإعلام إما سائلة أو صلبة في وسائل الاعلام على لوحات ، ولقد تم تطوير تقنيات لقياس مدى الحياة في ظل كل الظروف. هنا نقدم بروتوكول معمم لقياس مدى الحياة من الديدان الخيطية حافظت على نمو قوي وسائل الاعلام الديدان الخيطية وتغذت على وجبات من الأشعة فوق البنفسجية قتل البكتيريا. ويمكن بسهولة أن تتكيف هذه الإجراءات لفحص مدى الحياة في ظل ظروف مختلفة المشتركة ، بما في ذلك اتباع نظام غذائي يتكون من البكتيريا الحية ، وتقييد الغذائية ، وتدخل الحمض النووي الريبي.
Protocol
Discussion
وقد درس التحكم الجيني للتعمير على نطاق واسع في C. ايليجانس ، ويرجع ذلك إلى حد كبير إلى سهولة والسرعة التي يمكن أن تحدد مدى الحياة. بروتوكول مناقشتها في هذه المقالة إطارا أساسيا للحصول على بيانات عمر استنساخه في C. ويمكن أيضا ايليجانس ويمكن تطبيقها على ال?…
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من خلال الاختراقات غلين / تلعفر في المعاهد الوطنية للصحة وعلم الشيخوخة جائزة المنحة 1R01AG031108 – 01 إلى MKGS معتمد من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح التدريب P30AG013280. عضو الكنيست هو باحث طبي جديد اليسون مؤسسة في الشيخوخة.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Agar | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0145-17-0 (214530) | |
| Ampicillin | Reagent | MidSci | 0339 | |
| BactoTryptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0123-17-3 (211705) | |
| BactoPeptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0118-17-0 (211677) | |
| CaCl2 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9699248 (1332-01) | |
| Carbenicillin | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | C0109 | |
| Cholesterol | Reagent | Sigma-Aldrich | C75209 | |
| Fluorodeoxyuridine (FUDR) | Reagent | Sigma-Aldrich | F0503 | |
| Isopropyl β-d-Thiogalactopyranoside (IPTG) | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | I2481C5 | |
| KPi Dibasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087862 (3252-01) | |
| KPi Monobasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087861 (3246-01) | |
| MgSO4 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9561800 (2500-01) | |
| NaCl | Reagent | Fisher Scientific | S251 | |
| Tris | Reagent | Sigma-Aldrich | T1503 | |
| Yeast Extract | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0886-17-0 (288620) |
References
- Wood, W. B., Wood, W. B. . The Nematode Caenorhabditis elegans. , 1-16 (1988).
- Sutphin, G. L., Kaeberlein, M. Dietary restriction by bacterial deprivation increases life span in wild-derived nematodes. Exp Gerontol. 43, 130-135 (2008).
- Garigan, D. Genetic analysis of tissue aging in Caenorhabditis elegans: a role for heat-shock factor and bacterial proliferation. Genetics. 161, 1101-1112 (2002).
- Chen, D., Pan, K. Z., Palter, J. E., Kapahi, P. Longevity determined by developmental arrest genes in Caenorhabditis elegans. Aging Cell. 6, 525-523 (2007).
- Curran, S. P., Ruvkun, G. Lifespan regulation by evolutionarily conserved genes essential for viability. PLoS Genet. 3, e56-e56 (2007).
- Dillin, A. Rates of behavior and aging specified by mitochondrial function during development. Science. 298, 2398-2401 (2002).
- Hamilton, B. A systematic RNAi screen for longevity genes in C. elegans. Genes Dev. 19, 1544-1555 (2005).
- Hansen, M., Hsu, A. L., Dillin, A., Kenyon, C. New genes tied to endocrine, metabolic, and dietary regulation of lifespan from a Caenorhabditis elegans genomic RNAi screen. PLoS Genet. 1, 119-128 (2005).
- Lee, S. S. A systematic RNAi screen identifies a critical role for mitochondria in C. elegans longevity. Nat Genet. 33, 40-48 (2003).
- Smith, E. D. Age- and calorie-independent life span extension from dietary restriction by bacterial deprivation in Caenorhabditis elegans. BMC Dev Biol. 8, 49-49 (2008).
- Hodgkin, J., Horvitz, H. R., Brenner, S. Nondisjunction Mutants of the Nematode CAENORHABDITIS ELEGANS. Genetics. 91, 67-94 (1979).
- Emmons, S. W., Sternberg, P. W., Riddle, D. L., Blumenthal, T., Meyer, B. J., Priess, J. R. . C. ELEGANS II. , (1997).
- Lipton, J., Kleemann, G., Ghosh, R., Lints, R., Emmons, S. W. Mate searching in Caenorhabditis elegans: a genetic model for sex drive in a simple invertebrate. J Neurosci. 24, 7427-7434 (2004).
- Davis, B. O., Anderson, G. L., Dusenbery, D. B. Total luminescence spectroscopy of fluorescence changes during aging in Caenorhabditis elegans. Biochemistry. 21, 4089-4095 (1982).
- Klass, M. R. Aging in the nematode Caenorhabditis elegans: major biological and environmental factors influencing life span. Mech Ageing Dev. 6, 413-429 (1977).
- Steinkraus, K. A. Dietary restriction suppresses proteotoxicity and enhances longevity by an hsf-1-dependent mechanism in Caenorhabditis elegans. Aging Cell. 7, 394-404 (2008).
