大容量（20L）过滤沿海海水样品
Summary
此视频文件体积大（≥20 L）的过滤，微生物生物量，0.22μm的直径2.7μm之间不等，从水柱。
Abstract
工作流程开始与下游微生物群落的沿海海域，养分和微量气体分析的集合。对于这种方法，样品均采自HMS施德Saanich入口经营甲板。此视频文件体积大（≥20 L）的过滤，微生物生物量，0.22μm的直径2.7μm之间不等，从水柱。使用单泵机组配有4个旋转磁头，两个20L样品可同时进行过滤。过滤是在延长旅行领域，或后立即一日游的回报。穿过每一个sterivex过滤装置，重要的是要记录的水量。为了防止生物膜之间的采样人次的形成，所有的过滤设备，必须用稀盐酸和去离子水冲洗，高压灭菌后立即使用。此过程将需要大约5个小时，加上清理的额外小时。
Protocol
设置过滤装置 要设置过滤装置，使用镊子放入一个档次的GF / D转换过滤器的预过滤器的公屋单位。松散地用手拧紧的住房。作为一个经验法则，不要过分拧紧或单位将泄漏一旦开始抽水。 请小心插入carboy没有接触它的内部管蒸压帽和连接管的carboy第。如果必要，请使用镊子引导carboy管。 通过蠕动泵外部的油管。 将预过滤器的公屋单位都管（即2％carboy单?…
Discussion
当务之急是盐水中删除任何挥之不去的痕迹，否则将腐蚀设备后，使用湿毛巾擦拭长椅和泵。虽然过程很简单，时间要求，可广泛取决于生物质的浓度或在被筛选的样本碎片。
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我们要感谢支持沿海和公海水域低氧气地区正在进行的研究创新，不列颠哥伦比亚省知识发展基金和国家科学和工程研究理事会（NSERC），加拿大的加拿大基金会。提高妇女地位司的支持由NSERC，Killam和图拉基金会资助的微生物多样性和进化中心奖学金。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Peristaltic pump | Masterflex (Cole Palmer) | 77913-20, 77200-62, 77200-04 | ||
| Tygon LFL tubing | Masterflex (Cole Palmer) | 06429-24 | For filtration apparatus | |
| Hose clamps | Cole Palmer | 0683204 | For filtration apparatus | |
| 1/4” x 3/16” pipe adaptors | Cole Palmer | 31702-20 | For filtration apparatus | |
| Polypropylene prefilter housing | ADVANTEC | 501200 | For filtration apparatus | |
| Metal luer fitting (Hose end to Male luer lock) | Cole Palmer | 31507-27 | For filtration apparatus | |
| 2“ Magnets | For filtration apparatus | |||
| 3 port carboy caps | For filtration apparatus | |||
| GV 0.22 μm STERIVIX filters | Millipore | SVGV01R5 | ||
| 47 mm diameter 2.7 μm GF/D filters | Whatman | 1823047 | ||
| Lysis buffer | Reagent | 0.75 M sucrose, 40 mM EDTA, 50 mM Tris (pH 8.3) | ||
| 0.1 % HCl | Reagent | For post-filtration rinse | ||
| Autoclaved water | Reagent | For post-filtration rinse |
Tags
Large Volume FiltrationCoastal Seawater SamplesMicrobial Community AnalysisNutrient AnalysisTrace Gas AnalysisHMS John StricklandSaanich InletFiltration Of Microbial BiomassWater Column20L SamplesPump UnitRotating HeadsField FiltrationDay TripsSterivex Filter UnitBiofilm FormationDilute HCl RinsingDeionized Water RinsingAutoclavingClean Up
Cite This Article
Walsh, D. A., Zaikova, E., Hallam, S. J. Large Volume (20L+) Filtration of Coastal Seawater Samples. J. Vis. Exp. (28), e1161, doi:10.3791/1161 (2009).