और संभोग के Tetrad पृथक्करण Chlamydomonas reinhardtii जेनेटिक विश्लेषण के लिए
Summary
संभोग और tetrad जुदाई आनुवांशिक विश्लेषण के लिए आवश्यक हैं<em> Chlamydomonas reinhardtii</em>. यहाँ हम gametogenesis, संभोग, युग्मनज अंकुरण और tetrad विच्छेदन के लिए मानक तरीकों प्रदर्शित करता है. इस प्रोटोकॉल कि आनुवंशिक दृष्टिकोण वैज्ञानिकों ने कम से परिचित हैं करने के लिए उत्तरदायी बनाना होगा चरणों की एक श्रृंखला आसान पालन होते हैं<em> Chlamydomonas</em>.
Abstract
कोशिकीय हरी alga की<em> Chlamydomonas reinhardtii</em> (<em> Chlamydomonas</em>) अपने साधारण जीवन चक्र के कारण कोशिका जीव विज्ञान और आनुवंशिकी के विभिन्न क्षेत्रों में शोध के लिए लोकप्रिय जीव बन गया है, आनुवांशिक विश्लेषण, जीनोमिक संसाधनों, और नाभिक का transformability और दोनों organelles के लिए विकास और हेरफेर के आराम. संभोग उपभेदों एक आम बात है जब आनुवंशिक दृष्टिकोण में उपयोग किया जाता है<em> Chlamydomonass</em> प्रभुत्व के विश्लेषण के लिए वनस्पति diploids बनाने के लिए, या पता लगाने परमाणु बनाम organellar इनहेरीटेंस के लिए tetrad विच्छेदन के बाद, allelism परीक्षण, epistasy विश्लेषण, या नक्शा आधारित क्लोनिंग के प्रयोजन के लिए आबादी उत्पन्न. इसके अतिरिक्त, आनुवंशिक पार नियमित रूप से विशेष रूप से परमाणु जीनोटाइप के साथ organellar जीनोटाइप गठबंधन करने के लिए उपयोग किया जाता है. यहाँ हम gametogenesis, संभोग, युग्मनज अंकुरण और tetrad जुदाई के लिए मानक तरीकों प्रदर्शित करता है. इस प्रोटोकॉल कि आनुवंशिक दृष्टिकोण वैज्ञानिकों ने कम से परिचित हैं करने के लिए उत्तरदायी बनाना होगा चरणों की एक श्रृंखला आसान पालन होते हैं<em> Chlamydomonas</em>. मुख्य मापदंडों और मुसीबत स्पॉट की व्याख्या कर रहे हैं. अंत में, अधिक जानकारी और वैकल्पिक तरीकों के लिए संसाधनों प्रदान कर रहे हैं.
Protocol
Discussion
जेनेटिक विश्लेषण Chlamydomonas में सरल है, लेकिन यह gametes और अलग tetrad संतान उत्पन्न करने के लिए विशेष तकनीक की आवश्यकता है. स्वस्थ उपभेदों के साथ, तकनीक आसानी से हासिल कर ली हैं. कुछ उत्परिवर्ती उपभेदों के साथ, यह ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस प्रोटोकॉल Institut डी भौतिक Chimique Biologie, पेरिस, फ्रांस में Wollman फ्रांसिस – आन्द्रे की प्रयोगशाला में सीखा तकनीकों पर आधारित है. लेखक जैकलिन गिरार्ड Bascou, जो मूल Chlamydomonas आनुवंशिक तकनीक के लिए डीबीएस शुरू करने के लिए आभार का एक ऋण देने Chlamydomonas अनुसंधान लेखकों प्रयोगशाला में राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन पुरस्कार MCB 0646350 द्वारा समर्थित है ..
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| CC-125 | Mating type plus strain | Chlamydomonas Stock Center | ||
| CC-124 | Mating type minus strain | Chlamydomonas Stock Center | ||
| Tris-Acetate-Phosphate (TAP) | Growth medium | |||
| N10 | Growth medium | |||
| Difco agar | Reagent | |||
| Fisherbrand Stainless-Steel Blades | Tools | Fisher Scientific | 08-916-5B | |
| BD Surgical Blade Handles | Tools | Fisher Scientific | 08-914-5 | |
| Fisherbrand Metal Scalpels | Tools | Fisher Scientific | 08-920A |
References
- Harris, E. H. The Chlamydomonas Sourcebook: Introduction to Chlamydomonas and Its Laboratory Use. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. , 119-273 (2005).
