יצירת ניסויית מפרצת אבי העורקים הבטני Murine עם Elastase
Summary
וידאו זה מראה כיצד לגרום מפרצת אבי העורקים הבטני (AAA) בעכברים באמצעות עירוי intraluminal חולף של elastase הלבלב חזירי לתוך מגזר infrarenal של אבי העורקים בבטן. המודל יש את היכולת להוסיף תובנות לתוך pathobiology רחב של AAA בשל הופעתה של מהונדס רבים נוקאאוט בעכברים גנים.
Abstract
עירוי intraluminal חלוף של elastase הלבלב חזירי לתוך מגזר infrarenal של אבי העורקים בבטן הוא מודל החיה הנפוצה ביותר של מפרצת אבי העורקים הבטני (AAA) מאז זה תוארה לראשונה על ידי Anidjar ועמיתיו בחולדות. 1 הרציונל הפיתוח שלה התבססה על אופי שיבשו של ואלסטין שנצפתה AAAS. מודל זה עכברוש שונתה כדי לייצר AAAS באזור infrarenal אבי העורקים של עכברים. 2 מודל יש את היכולת להוסיף תובנה רחבה לתוך pathobiology של AAA בשל הופעתה של מהונדס רבים נוקאאוט בעכברים גנים. יתר על כן, היא פלטפורמה מעשית לבדוק סוכני טיפולית פוטנציאל AAA. בסרטון הזה, אנחנו מדגימים את הליך עירוי elastase AAA בשימוש במעבדה שלנו.
עכברים מורדמים באמצעות isoflurane 2.5%, ו laparotomy מבוצעת בתנאים סטריליים. Aortais בטן מבודד בסיוע stereomicroscope ההפעלה (לייקה). לאחר הצבת חיבורי אותיות זמני סביב האאורטה הפרוקסימלית ומ דיסטלי, aortotomy נוצר ב הסתעפות עם קצה מחט 30-מד. קטע חום מחודדות של צינורות פוליאתילן PE-10 הוא הציג דרך aortotomy ומאובטחת. לומן העורקים היא perfused לאחר מכן ב 100 מ"מ כספית עם סוג המכיל תמיסת מלח אני elastase חזירי הלבלב (4.5 U / mL: Sigma כימית ושות') במשך 5-15 דקות. לאחר הסרת הקטטר זלוף, aortotomy הוא תוקן ללא התכווצות של לומן.
Protocol
Discussion
מחקרים קודמים ציין וריאציה משמעותית הרבה-to-הרבה בפיתוח AAA מ שונה ההכנות elastase מסחרי 3. לכן, חשוב לעקוב אחר המון הייצור וכן יש קבוצות ביקורת מתאימות כדי לתעד את היכולת של התכשיר כדי לגרום AAAS.
מעניין, הרגישות פיתוח AAA במודל זה תלו…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו נתמכה המענק SCCOR "מחלת AAA: מנגנונים, ריבוד, וטיפול" (HL083800 P50-03) מן המכון הלאומי לבריאות
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
References
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
