우리는 미래의 핵산 기반 치료제를위한 균일한 및 사용자 정의 polyplexes보다 제어하고 합성을 제공하는 것으로 예상된다 고분자 전해질의 polyplexes의 형성을 조사하기 위해 nanophotonics (QD – 걱정)와 microfluidics의 소설과 강력한 통합을 제시한다.
유전체학의 발전은 세포 및 분자 수준에서 pathogenesis를 타겟팅할 수 있습니다 치료제의 개발을 연료로 진행합니다. 세포 내부의 일반적 기능, 핵산 기반 치료제는 효율적인 세포 전달 시스템이 필요합니다. 하나는 널리 채택 방법은 저하에 대해 그것을 보호하면서 DNA의 세포 이해를 촉진, 자기 조립 정전기를 통해 nanocomplexes를 형성하는 유전자 캐리어와 복잡한 DNA 것입니다. 조기 분리하거나 지나치게 안정 바인딩 세포 이해와 치료 효능에 해로운 것입니다 때문에 과제는 효율적인 유전자 사업자의 합리적인 설계에 자리잡고 있습니다. 대량 혼합하여 합성 Nanocomplexes는 nanocomplexes의 크기와 안정성에 이질에 기인했다 풀고 세포와 인신 매매 행위의 다양한을 보여주었다. 이러한 이질은 자기 조립 속도론의 정확한 평가를 방해하고 transfection 효율성이나 bioactivities 자신의 물리적 속성을 연관의 어려움으로 추가합니다. 우리는 층류에서 nanocomplex 자기 조립의 실시간 속도론을 특성화 nanophotonics (즉, QD – 걱정)와 microfluidics의 소설 컨버전스를 제시한다. microfluidics가 높은 시간적 공간 해상도 (~ 밀리초)와 프로세스를 분석 잘 제어 microenvironment를 제공하는 반면 QD – 걱정은 합성 과정에서 분자 상호 작용 및 정량 측정의 발병의 매우 민감한 표시를 제공합니다. 고분자 nanocomplexes의 모델 시스템의 자기 조립 과정에서 별개의 두 단계는이 분석 플랫폼에 의해 점령되었다. microscale에서 얻은 자기 조립 공정의 운동 양상은 많은 마이크로 및 나노 스케일 응용 프로그램에 관련된 microreactor 기반 반응에 특히 도움이 될 것입니다. 또한, nanocomplexes는 microfludic 장치의 적절한 설계를 통해 사용자 정의할 수 있으며, 결과 고분자 DNA를 nanocomplexes가 쉽게 구조 – 기능 관계를 설립 적용 될 수 QD는 – 무서워.
The authors have nothing to disclose.
NIH 그랜트 HL89764, NSF 교부금 0,546,012, 0,730,503 및 0,725,528에 의해 제공된 자금 지원.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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SU-8 | MicroChem | SU-8 2025 | ||
PDMS | Dow Corning | Sylgard 184 | ||
Plasmid DNA | Clontech | pEGFP-C1 | 4.9 kb, MW = 3.3 x 106 | |
LabelIT Biotin Labeling Kit | Mirus Bio LLC | MIR 3400 | Standard protocol yields labeling efficiency of approximately one label every 20-60 bp of double-stranded DNA, The density of labeling was adjusted in this work. | |
Streptavidin 605QD | Invitrogen | Qdot® 605 ITK™ Streptavidin Conjugate | ||
Cy5-NHS Ester | Amersham Biosciences | PA15101 | ||
Chitosan | Vanson | 390 kDa | 83.5% deacetylated | |
Cover Glass | Fisher | 12-545C | No. 1; Size: 40 x 22mm | |
Gastight Glass Syringe | Hamilton | TLL series | 50μL to 500μL depending on sample volume | |
Tygon Tubing | SmallParts | 0.02 ID, 100ft | Tygon Tubes Microbore, 0.02 ID, 100ft | |
Connector | SmallParts | HTX-23R | Customized in length of 0.750″ | |
Syringe Pump | Harvard Apparatus | PHD-2000 | ||
CCD | Qimaging | Intensified Retiga Cooled | ||
Microscope | Olympus | BX-51 | 100W mercury arc lamp | |
ImageJ | NIH | v1.36b | http://rsb.info.nih.gov/ij | |
Origin Pro8 | OriginLab | Student Version | ||
Microscope Filter sets | Omega Optical | 475AF40 | Excitation filter in both channels | |
Microscope Filter sets | Omega Optical | 595AF60 | Emission filter in 605QD channel | |
Microscope Filter sets | Omega Optical | 670DF40 | Emission filter in QD-FRET channel | |
Microscope Filter sets | Omega Optical | 500 DRLP | Long pass dichroic in 605QD channel | |
Microscope Filter sets | Omega Optical | 595DRLP | Long pass dichroic in QD-FRET channel |