内皮细胞集落形成祖细胞(ECFCs)是一种很有前途的的工具来研究血管稳态和维修。<sup> 1,2</sup本文介绍了一种新的动物血清,肝素成人外周血汇集人类血小板裂解液抗牛免疫的风险递减(pHPL)隔离和扩展ECFC方法。
本文介绍了一个新颖的恢复策略,对内皮细胞集落形成祖细胞肝素(ECFCs),但在其他unmanipulated成人外周血内,平均12天。 > 1 × 10 8 ECFCs大规模扩张后可以得到进一步的测试。有利的是,通过使用pHPL人体细胞与牛血清抗原的接触可以被排除在外。通过流式细胞仪和免疫组化分离的细胞可以被定性为ECFC 和他们在体外的功能,形成像血管结构,可在基质胶实验测试。这些细胞可皮下注射的小鼠模型,以形成功能, 在体内血管灌注。经过长期的扩张和冷冻保存扩散,功能和基因组的稳定性出现3,4予以保留。
这种动物蛋白的隔离和扩展方法是很容易适用于生成大量的ECFCs。
这种新颖的隔离和扩展方法是一种简单而有效的过程,更有效率和更短的时间消耗,避免任何细胞分离(不需要密度梯度),比传统技术更便宜。通过使用pHPL接触到牛抗原和公认的后续xenoimmunization被排除在外。文化期间可形成小血块,pHPL造成。根据我们的经验,这些凝块不影响细胞集落形成和细胞增殖或功能。
作者感谢提供优秀的技术协助pHPL和Margaretha Frühwirth和丹妮拉泰勒博士卡塔琳娜Schallmoser。