Summary

Электропрядения Волокнистые Строительные леса Полимер для тканевой инженерии и клеточной культуры

Published: October 21, 2009
doi:

Summary

Процесс электропрядения полимеров для тканевой инженерии и клеточной культуры рассматривается в данной статье. В частности, электропрядения из фотореакционноспособных macromers с дополнительными возможностями обработки photopatterning и мульти-полимерный электропрядения описано.

Abstract

Как области тканевой инженерии развивается, есть огромный спрос, чтобы произвести больше подходящие материалы и методы обработки в целях удовлетворения требований (например, механиков и кровоснабжение) более сложные органы и ткани. Электропрядения является популярная техника для создания волокнистых строительные леса, которые имитируют архитектуру и размер масштаба родной внеклеточного матрикса. Эти волокнистые лесов могут быть также использованы в качестве субстратов культуре клеток с волокнами могут быть использованы для прямого сотовой поведения, включая дифференциацию стволовых клеток (см. обширные обзоры Mauck<em> Соавт.</em> И подоконников<em> Соавт.</em> Для получения дополнительной информации). В этой статье мы рассмотрим общие процесс электропрядения полимеров и в качестве примера, electrospin реактивной гиалуроновая кислота способна сшивания с освещенности (см. Ifkovits<em> Соавт.</em> Для обзора по photocrosslinkable материалов). Мы также ввести дополнительные возможности обработки, такие как photopatterning и мульти-полимерный эшафот образования. Photopatterning может быть использован для создания лесов с каналами и различных масштабов увеличения пористости клеточной инфильтрации и тканевого распределения. Multi-полимер леса полезны для лучшей настройки свойств (механика и деградации) леса, в том числе с учетом пористости для клеточной инфильтрации. Кроме того, эти методы могут быть расширены и включать широкий спектр полимеров и реактивной macromers создавать сложные строительные леса, которые предоставляют сигналы необходимые для успешного развития тканей инженерных конструкций.

Protocol

А. Одноместный Полимерные электропрядения До подготовки электропрядения решение, сделать 0,5% решение фотоинициатора, Irgacure 2959 (I2959), в деионизированной водой, растворяя при температуре 37 ° С в течение нескольких дней. Этот шаг не является необходимым, если фотореакционноспособных ?…

Discussion

Электропрядения был использован для подготовки волокнистых леса из полимеров. Photocrosslinkable лесов на основе гиалуроновой кислоты были использованы в качестве наглядного примера, где освещенность нужна для сшивания. С помощью реактивного macromers, таких как MeHA, каналы, которые ранее продемон…

Acknowledgements

Эта работа была поддержана американской ассоциации сердца Predoctoral стипендий для JLI и Национального института Хит грант R01AR056624.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
DAPI Reagent Invitrogen D1306  
I2959 Reagent Ciba Specialty Chemicals    
PEO 200 kDa   Polysciences 17503  
PEO 900 kDa Reagent Sigma 189456  
Methacryloxethyl thiocarbamoyl rhodamine B Reagent Polysciences 23591-100 Prepare stock solution in DMSO
Live/Dead Stain Kit Reagent Invitrogen L3224 Contains Calcein (stains live cells green) and ethidium homodime (stains red dead cells)
Syringe Pump Equipment KD Scientific KDS100 Two are needed for dual polymer spinning
Power Source Equipment Gamma High Voltage ES30P-5W Two are needed for dual polymer spinning
Motor Equipment Triem Electric Motors, Inc 0132022-15 Must attach to a custom built mandrel
Tachometer Equipment Network Tool Warehouse ESI-330 Use to monitor mandrel speed
Omnicure UV Spot Cure System with collimating adapter Equipment Exfo Life Sciences Division S1000  
Silicone Tubing Equipment McMaster-Carr 51135K151  
Luer Lock Female Adapter Equipment McMaster-Carr 51525K293  
Luer Lock Male Adapter Equipment McMaster-Carr 51525K143  
Needles Equipment Fisher Scientific 14-825-16H  
Coverslips Equipment Corning 2875-22  

References

  1. Burdick, J. A., Chung, C., Jia, X., Randolf, M. A., Langer, R. Controlled degradation and mechanical behavior of photopolymerized hyaluronic acid networks. Biomacromolecules. 6, 386-391 (2005).
  2. Baker, B. M., Gee, A. O., Metter, R. B., Nathan, A. S., Marklein, R. A., Burdick, J. A., Mauck, L. R. The potential to improve cell infiltration in composite fiber-aligned electrospun scaffolds by the selective removal of sacrificial fibers. Biomaterials. 29, 2348-2358 (2008).
  3. Ifkovits, J. L., Burdick, J. A. Review: Photopolymerizable and degradable biomaterials for tissue engineering applications. Tissue Engineering. 13, 2369-2385 (2007).
  4. Khademhosseini, A., Eng, G., Yeh, J., Fukuda, J., Blumling, J., Langer, R., Burdick, J. A. Micromolding of photocrosslinkable hyaluronic acid for cell encapsulation and entrapment. J. Biomed Mater Res A. 79A, 522-532 (2006).
  5. Mauck, R. L., Baker, B. M., Nerurkar, N. L., Burdick, J. A., Li, W. J., Tuan, R. S., Elliott, D. M., M, D. Engineering on the Straight and Narrow: The Mechanics of Nanofibrous Assemblies for Fiber-Reinforced Tissue Regeneration. Tissue Engineering B. 15, 171-193 (2009).
  6. Sill, T. J., Von Recum, H. a. v. o. n. Electrospinning: applications in drug delivery and tissue engineering. Biomaterials. 29, 1989-2006 (2008).
  7. Sundararaghavan, H. G., Metter, R. B., Burdick, J. A. Electrospun fibrous scaffolds with multi-scale and photopatterned porosity. , (2009).
check_url/1589?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Ifkovits, J. L., Sundararaghavan, H. G., Burdick, J. A. Electrospinning Fibrous Polymer Scaffolds for Tissue Engineering and Cell Culture. J. Vis. Exp. (32), e1589, doi:10.3791/1589 (2009).

View Video