在成年斑马鱼的眼窝射出
Summary
在这里，我们展示如何在成年斑马鱼眼窝注射。
Abstract
整体动物药物治疗是一种必不可少的工具，在任何药理和化学遗传研究的模型系统。静脉（IV）注射液往往是最有效和无创性的形式利益的代理人交付。在斑马鱼（<em>斑马鱼</em>），四，注射药物一直是因为小血管直径挑战。这也证明了在hematopoeitic干细胞移植过程中的细胞注射的重大障碍。从历史上看，注射到血液中，直接通过心脏。然而，这种心脏内的过程有一个非常高的死亡率，心往往是在离开容易发生感染，大量失血或致命的器官损害的鱼注射刺破。我们用鼠标的经验，我们开发了一个新的注射过程，在斑马鱼注射部位在背后的眼睛，眼窝静脉窦。这种复古的轨道（RO）注射技术已成功地采用了在成鱼注射药物以及整个肾骨髓细胞移植。 RO注入了一个比传统的心脏内注射的死亡率要低得多。鱼类，注入复古轨道往往出血少的注射后，在风险的伤害要低得多的一个主要器官如心。此外，正确执行时，注入的细胞和/或药物迅速进入血液，使化合物，全鱼和肾细胞施加影响，以自己的优势轻松地回家。因此，这种新的注射技术，最大限度地降低了死亡率，同时允许有效地提供材料到成鱼的血液。在这里，我们举例说明这种技术由眼窝TG注射（<em>珠</em>：GFP）的细胞转化为成人<em>卡斯帕尔</em>鱼以及一个红色荧光染料注射液（右旋糖酐，德克萨斯红<em></em>）到成年<em>卡斯帕尔</em>鱼。然后，我们整个动物荧光显微镜可视化成功的注射。
Protocol
Discussion
在成年斑马鱼的眼窝注射使注射材料交付的效率最高，血液中的死亡率与发病率最低。由于注射部位的性质，出现穿刺愈合快，减少发生感染和出血量。该网站甚至可能被多次注入在一个短的时间内每天注射药物，例如。
在这种鱼是简单的浸泡和浸泡在含有药物的利息的水成鱼的传统治疗方法，必须购买大量毒品。然而，如果药物直接注入动物的血液，一个更小的数量是需?…
Acknowledgements
这项工作是霍华德休斯医学研究所和美国国立卫生研究院研究胚胎造血授予的支持。
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Heparin sodium salt from porcine intestinal mucosa | Sigma-Aldrich | 2106 | Preweighed vial of 300 USP units | |
| Tricaine-S | Western Chemical | MS-222 | ||
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Invitrogen | 14190-144 | ||
| Dextran, Texas Red® | Molecular Probes Inc. | D1830 | ||
| E3 | 5mM NaCl 0.17 mM Kcl 0.33 mM CaCl2 0.33 mM MgSO2 |
|||
| Microliter Syringe | Hamilton | 80300 | 701N 10uL SYR (26s/2”/2) |
References
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