Модель возмущенного течения индуцированного атеросклероза в сонной артерии мыши по частичному Лигирование и простой способ выделения РНК из сонной эндотелия
Summary
Это описывает частичную операцию перевязки сонных, что вызывает нарушение условий потока и последующего развития атеросклероза (в две недели) с intraplaque нео-васкуляризации (в четыре недели) в мышь общей сонной артерии. Мы также описывают новый метод РНК изоляции от сонных интима, обеспечивая высокую чистоту эндотелиальных РНК.
Abstract
Несмотря на известные тесные связи, прямые доказательства, связывающие возмущенного течения в атерогенеза не хватало. Недавно мы использовали модифицированную версию сонной частичные методы перевязки [1,2], чтобы показать, что она остро вызывает низкий и колебательного потока условия, два ключевых характеристик возмущенного течения, в мыши общей сонной артерии. Используя эту модель, мы представили прямые доказательства того, что возмущенного течения действительно приводит к быстрой и надежной развитие атеросклероза в аполипопротеине мыши нокаутом E [3]. Мы также разработали метод подготовки эндотелиальных РНК с высокой чистоты от мыши сонных интима [3]. Используя эту модель мыши и метод, мы обнаружили, что частичная перевязка причины дисфункции эндотелия в неделю, а затем надежный и быстрый атеромы формирования в две недели в мышиной модели гиперлипидемией наряду с особенностями образования комплекса поражения, такие как intraplaque неоваскуляризации на четыре недели. Этот быстрый<em> В естественных условиях</em> Модель и эндотелиальных подготовки РНК метод может быть использован для определения молекулярного механизмов, лежащих поток-зависимой регуляции сосудистого биологии и болезней. Кроме того, он может быть использован для тестирования различных терапевтических мероприятий, направленных эндотелиальной дисфункции и атеросклероза в значительно сокращается продолжительность исследования.
Protocol
Discussion
В этой процедуре, соответствующей идентификации всех ветвей общей сонной в том числе наружной сонной, внутренней сонной артерии, затылочной артерии и артерии щитовидной превосходной имеет важное значение. Важно также, чтобы проверить картины течения с помощью ультразвука, как показа?…
Acknowledgements
Эта работа была поддержана финансирование NIH гранты HL87012 (HJ), HL75209 (HJ), UO1HL80711 (DH, DG, HJ) и World Class университета Проекта (ГП) из министерства науки, технологий и образования Южной Кореи.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Normal Saline (0.9% sodium chloride) | Baxter | 2B1323 | ||
| Insulin syringe (3/10 ml 29g syringe) | Tyco Health care | 8881600145 | ||
| HBSS | Cellgro, Mediatech, Inc. | 21-023 | ||
| miRNeasy mini kit (including, QIAzol) | QIAGEN | 217004 | ||
| Vevo 770 High-Resolution Micro-Imaging System | Visualsonics | a.Visualsonics 770 system b.Imaging stage c.Vevo integrated rail system d.RMV scan head for mice |
or similar system | |
| 6-0 Silk Suture, sterile | Covidien | s-1172 c2 | ||
| Small scissors | Roboz | RS-5675 | or similar | |
| Dissecting Forceps | Roboz | RS-5005 | or similar | |
| Tissue Mend II | Webster Vet Supply | 07-856-7946 |
References
- Korshunov, V. A., Berk, B. C. Flow-induced vascular remodeling in the mouse: a model for carotid intima-media thickening. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 23 (12), 2185-2191 (2003).
- Sullivan, C. J., Hoying, J. B. Flow-dependent remodeling in the carotid artery of fibroblast growth factor-2 knockout mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 22 (7), 1100-1105 (2002).
- Nam, D. Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 297 (4), H1535-H1543 (2009).
