Homogene snelle detectie van biologische testen met behulp van Magnetic Modulation biosensing System
Summary
Magnetische modulatie biosensing systeem wordt gebruikt om snel, gevoelig en eenvoudig te detecteren biologische assays, zoals DNA-moleculen en eiwitten.
Abstract
Een magnetische modulatie biosensing systeem (MMB) [1,2] snel en homogeen zijn ontdekt biologische doelwitten bij lage concentraties, zonder wassen of scheiding stap. Wanneer de IL-8 doelwit aanwezig was, een 'sandwich'-gebaseerde test bevestigd magnetische korrels met IL-8-capture antilichaam aan gekoppeld fluorescerende eiwit streptavidine via de IL-8 target en een gebiotinyleerde IL-8 antilichaam. De magnetische kralen zijn gemanoeuvreerd in de oscillerende beweging door het aanbrengen van een wisselend magnetisch veld gradiënt door middel van twee elektromagnetische polen. De fluorescerende eiwitten, die zijn bevestigd aan de magnetische korrels worden samengevat in de detectie gebied en hun beweging in en uit een orthogonale laserstraal produceert een periodieke fluorescent signaal dat gedemoduleerd synchrone detectie. De magnetische modulatie biosensing systeem werd vroeger gebruikt om de coderende sequenties van de niet-structurele Ibaraki virus eiwit 3 (NS3) complementair DNA (cDNA) [2] op te sporen. De technieken die in dit werk aangetoond voor externe manipulatie en condensatie van deeltjes kunnen worden gebruikt voor andere toepassingen, zoals de levering van magnetisch gekoppelde drugs<em> In-vivo</em> Of verbeteren van het contrast<em> In-vivo</em> Grafische toepassingen.
Protocol
Discussion
Samengevat, we laten zien dat de MMB systeem kan worden gebruikt om de aanwezigheid van IL-8 doelwit te detecteren bij lage concentraties (0,5 pico-gram is de detectiegrens van de Bio-Plex Precision Pro cytokine assays [3,4]). Het vermogen van het systeem is niet beperkt tot IL-8 en kan gebruikt worden om andere eiwitten te detecteren. De voordelen van de MMB-systeem zijn de mogelijkheid om de doelgroep te detecteren snel en zonder enige scheiding of wasstap. Zo, het vergemakkelijkt de detectie proces en kan het systeem…
Acknowledgements
Dit werk werd mede ondersteund door het Ishaya Horowitz Fonds.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Bio-Plex Pro Human Cytokine IL-8 set | Bio-Rad | 171-B5008M | ||
| Recombinant human IL-8 target | Thermo Scientific | R202625 | ||
| Biotinylated monoclonal mouse anti human IL-8 antibody G265-8 | BD Biosciences | 554718 | ||
| Streptavidin coupled fluorescent protein | Bio-Rad | Streptavidin PE |
References
- Danielli, A., Arie, A., Porat, N., Ehrlich, M. Detection of fluorescent-labeled probes at sub-picomolar concentrations by magnetic modulation. Optics Express. 16, 19253-19259 (2008).
- Danielli, A., Porat, N., Arie, A., Ehrlich, M. Rapid homogenous detection of the Ibaraki virus NS3 cDNA at pico-molar concentrations by magnetic modulation. Biosensors and Bioelectronics. 25, 858-863 (2009).
- . . Bio-Rad “Human angiogenesis assay panel”. , .
- . Instruction Manual. Bio-Plex Precision Pro Cytokine Assay. , .
