चुंबकीय मॉडुलन biosensing प्रणाली के लिए तेजी से, संवेदनशीलता और बस डीएनए अणु और प्रोटीन के रूप में जैविक assays, का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है.
Abstract
एक चुंबकीय मॉडुलन biosensing प्रणाली (संदेश) [1,2] तेजी से और किसी भी धोने या जुदाई कदम के बिना कम सांद्रता में homogeneously पता चला जैविक लक्ष्य. जब आईएल – आठ लक्ष्य मौजूद थे, 'एक sandwich' आधारित परख आईएल-8 कब्जा एंटीबॉडी के साथ संलग्न चुंबकीय मोतियों आईएल-8 लक्ष्य और एक biotinylated आईएल 8 एंटीबॉडी के माध्यम से युग्मित फ्लोरोसेंट प्रोटीन streptavidin. चुंबकीय मोतियों oscillatory प्रस्ताव में दो विद्युत खंभे के माध्यम से एक बारी चुंबकीय क्षेत्र ढाल लागू करने के द्वारा चतुराई कर रहे हैं. फ्लोरोसेंट प्रोटीन है, जो चुंबकीय मोतियों से जुड़े होते हैं पता लगाने और में और बाहर एक orthogonal लेजर बीम एक आवधिक फ्लोरोसेंट संकेत है कि तुल्यकालिक पता लगाने का उपयोग demodulated है उत्पादन के क्षेत्र में उनके आंदोलन संघनित कर रहे हैं. चुंबकीय मॉडुलन biosensing प्रणाली पहले गैर संरचनात्मक Ibaraki वायरस 3 प्रोटीन (NS3) पूरक डीएनए (सीडीएनए) [2] के कोडन दृश्यों का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया गया था. तकनीक है कि इस काम में बाह्य और कणों में हेरफेर संक्षेपण के लिए प्रदर्शन कर रहे हैं अन्य अनुप्रयोगों, जैसे चुंबकीय मिलकर दवाओं के वितरण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है<em> में इन विवो</em> या के लिए विपरीत बढ़ाने<em> में इन विवो</em> इमेजिंग अनुप्रयोगों.
Protocol
आईएल: परख 8 प्रतिक्रिया मिश्रण निम्नलिखित चार घटकों उनके संबंधित सांद्रता में 100 μl परख बफर के अंतिम मात्रा में शामिल है. मोती 100 / μl अंतिम सांद्रता, 2 1 nano-gram/μl अंतिम एकाग्रता पर μl biotinylated आईएल 8 एंटीबॉडी के, 1 20 nan…
Discussion
संक्षेप में, हम पता चला है कि बोर्ड प्रणाली कम सांद्रता (0.5 पिको – ग्राम जैव Plex प्रेसिजन प्रो साइटोकाइन assays [3,4] का पता लगाने सीमा) पर आईएल-8 लक्ष्य की उपस्थिति का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. प्रणा…
Acknowledgements
इस काम आंशिक रूप से Ishaya Horowitz फंड द्वारा समर्थित किया गया था.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Bio-Plex Pro Human Cytokine IL-8 set
Bio-Rad
171-B5008M
Recombinant human IL-8 target
Thermo Scientific
R202625
Biotinylated monoclonal mouse anti human IL-8 antibody G265-8
Danielli, A., Porat, N., Ehrlich, M., Arie, A. Rapid Homogeneous Detection of Biological Assays Using Magnetic Modulation Biosensing System. J. Vis. Exp. (40), e1935, doi:10.3791/1935 (2010).