Fly Аспиратор трубки: простой инструмент для передачи Live Drosophila

Overview

Это видео описывает один метод, чтобы построить муху аспиратор, который может быть использован для передачи насекомых между корпусами без анестезии. Аспиратор в примере протокола был подготовлен для эксперимента по количественной оценке поведения индивидуального ухода

Protocol

Этот протокол является выдержкой из Barradale и др.,Количественная оценка Дрозофила Уход Поведение, J. Vis. Exp. (2017).

1. Подготовь аспиратор для перемещения живой Дрозофилы из культурного флакона в камеру ухода. Аспираторы позволяют передавать сознательных животных в поведенческие камеры, чтобы анестезия не влиять на последующее поведенческое наблюдение.
   1. С помощью ножниц вырезать 1,5 футов tygon трубки ID 1/8", OD 1/4 ". Отрежьте по крайней мере 1 дюйм от кончика 1 мл одноразовый наконечник микропипетта. Держите 1 см квадратный кусок сетки (открытие 0,196 дюйма) над разрезом кончика.
      ПРИМЕЧАНИЕ: Большинство 1mL советы имеют градацию линии, где кончик сидит в пакете поле, как правило, сократить до этой линии.
   2. Плотно поместите свежий 1 мл micropipette отзыв над сеткой / вырезать отзыв. Наблюдайте, как сетка формирует плотный барьер между двумя наконечниками. Внутри нового наконечника создается камера для хок.
   3. Вырежьте крайнюю кончик нового наконечника микропайпета, чтобы расширить отверстие достаточно, чтобы позволить прохождение одной мухи. Отверстие будет примерно соответствовать открытию камеры для ухода (примерно 1,5-2 мм в диаметре).
   4. Плотно подходят вложенные советы на конце трубки tygon. Нажмите кончики в трубку, чтобы обеспечить плотную форму, чтобы обеспечить вакуумное давление.
   5. На другом конце трубки, вырезать кончик 200 йл микропайпетт кончик и подходят узкий конец разреза в трубы. Это "рот" стороны аспиратора.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
High-Flex Tygon PVC Clear Tubing	McMaster-Carr	5229K54	ID 1/8", OD 1/4", used with micropipettor tips and mesh to construct mouth aspirators
Micropipette tips (1 mL and 200 μL)	Genesee Scientific	24-165, 24-150R
Nylon Mesh Screen, 2 x 2.6"	McMaster-Carr	9318T44	Used to construct grooming chamber and mouth aspirators