Accoppiamento e messa in scena delle uova: un metodo per generare embrioni e ordinarli per fase di sviluppo
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Hostelley T.L., et al. Preparazione e analisi dei campioni di dati di espressione genica basati su RNASeq di Zebrafish. J. Vis. Exp. (2017)
L’articolo descrive un protocollo per generare embrioni di zebrafish attraverso l’accoppiamento naturale e lo smistamento delle loro fasi di sviluppo. Il protocollo viene ulteriormente utilizzato per l’analisi delle cellule β pancreatiche utilizzando pesci transgenici.
Protocol
1. Generare embrioni attraverso l’accoppiamento naturale Embrioni di coltura fino a 3 mesi di età, maturità riproduttiva. Separare i pesci adulti maschi e femmine dal ceppo desiderato in serbatoi di accoppiamento divisi la sera prima della raccolta degli embrioni e aggiungere 2 maschi e 3 femmine a ogni serbatoio.NOTA: L’uso del ceppo reporter fluorescente transgenico insulin2a:mCherry ha permesso l’analisi delle cellule β pancreatiche. Trasf…
Materials
| ins2a:mCherry | ZIRC | ZL1483 | |
| Mating tanks 1.0L Crossing Tank Set | Aquaneering | ZHCT100 | |
| Dissecting Microscope | Zeiss |
Cite This Article
Mating and Egg Staging: A Method to Generate Embryos and Sort Them by Developmental Stage. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20183, doi: (2023).