Summary

Rotenone के मौखिक प्रशासन आंत्र तंत्रिका तंत्र में एक Gavage और अल्फा synuclein Inclusions की छवि विश्लेषण का उपयोग

Published: October 26, 2010
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Summary

पार्किंसंस रोग कीटनाशकों के संपर्क करने के लिए संबंधित दिया गया है. यहाँ हम एक विधि वांछित एकाग्रता और एक अल्फा synuclein संचय में आंतों का तंत्रिका तंत्र में उनके प्रभाव का विश्लेषण विधि में एक गैस्ट्रिक ट्यूब का उपयोग कीटनाशकों देने दिखाओ.

Abstract

पार्किंसंस रोग रोगियों (पीडी), जुड़े विकृति एक विशेषता पैटर्न शामिल अंतर अन्य बातों के साथ आंतों का तंत्रिका तंत्र 1,2 (ENS), घ्राण बल्ब (ओ), वेगस 3 (DMV) के पृष्ठीय मोटर नाभिक, intermediolateral के बाद रीढ़ की हड्डी में 4 और substantia nigra के नाभिक, 4,5 रोग के neuropathological मंचन के लिए आधार प्रदान करते हैं. ENS और ओबी सबसे उजागर तंत्रिका संरचनाओं और पहले प्रभावित होने वाले हैं. दिलचस्प है, पीडी कीटनाशक 6-8 जोखिम के लिए संबंधित दिया गया है . यहाँ हम विस्तार में दो हमारे पिछले अध्ययन में 9 तरीकों का इस्तेमाल किया दिखाते हैं. आदेश में rotenone ENS पर स्थानीय रूप से अभिनय के प्रभाव का विश्लेषण करने के लिए, हम एक वर्षीय C57/BL6 चूहों को एक gavage का उपयोग कर rotenone दिलाई. Rotenone एक व्यापक रूप से इस्तेमाल कीटनाशक है कि जोरदार mitochondrial परिसर 10 मैं रोकता है . यह अत्यधिक lipophylic और खराब जठरांत्र पथ में 11 अवशोषित है. हमारे नतीजे बताते हैं कि 5 मिलीग्राम / किलो rotenone के प्रशासन mitochondrial परिसर मैं मांसपेशियों या मस्तिष्क में गतिविधि को बाधित नहीं किया. सुझाव इस प्रकार, कि हमारे प्रशासन विधि rotenone का उपयोग hepatoportal प्रणाली को पार नहीं किया था और ENS पर पूरी तरह अभिनय. यहाँ हम कीटनाशकों का उपयोग कर एक gavage और छवि विश्लेषण ENS में अल्फा synuclein संचय में कीटनाशक के प्रभाव का विश्लेषण करने के लिए इस्तेमाल किया प्रोटोकॉल प्रशासन विधि दिखा. पहला हिस्सा एक तरीका है कि एक वांछित सटीक एकाग्रता में कीटनाशकों (rotenone) की intragastric प्रशासन की अनुमति देता है दिखाता है. दूसरी विधि अर्द्ध स्वचालित छवि विश्लेषण के एक छवि विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग ENS में अल्फा synuclein संचय विश्लेषण प्रोटोकॉल से पता चलता है.

Protocol

1) Rotenone की intragastric प्रशासन पशु वजन. / Rotenone वाहन की जरूरत समाधान की कुल मात्रा की गणना. इस मामले में जानवरों के वजन के प्रति ग्राम 0.01 मिलीग्राम. Rotenone समाधान के पहले गणना की मात्रा (0.625 मिलीग्राम / एमएल rotenone, 4% c…

Discussion

Intragastric प्रशासन पहले 12 प्रदर्शन किया गया है. हालांकि, Inden पांडुलिपि के अनुसार, rotenone प्रशासित 0.5% carboxymethylcellulose सोडियम नमक (CMSS) अकेले में भंग किया गया था. Rotenone एक उच्च liphophylic पदार्थ है. इसलिए, rotenone 0.5% CMSS में अकेले भंग नहीं क?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

पेड्रो Barrie डे ला Maza फाउंडेशन ने इस काम का समर्थन किया.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Rotenone   SIGMA-Aldrich R8875 Germany
Chloroform   Carl Roth 3313.1 Germany
Carboxymethylcellulose   SIGMA-Aldrich C5678 Germany
Gavage 1,2 mm x 60 mm   Unimed   Switzerland
LSM 510   Zeiss Microscopes    
FIJI   http://pacific.mpi-cbg.de    

References

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Cite This Article
Pan-Montojo, F. J., Funk, R. H. Oral Administration of Rotenone using a Gavage and Image Analysis of Alpha-synuclein Inclusions in the Enteric Nervous System. J. Vis. Exp. (44), e2123, doi:10.3791/2123 (2010).

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