Устные Администрации Ротенон использованием принудительного кормления и анализ изображений Альфа-синуклеина включений в кишечной нервной системы
Summary
Болезнь Паркинсона была связана с воздействием пестицидов. Здесь мы показываем, метод для доставки пестицидов помощью желудочного зонда на нужной концентрации и метод для анализа их влияния в альфа-синуклеина накопления в кишечной нервной системы.
Abstract
При болезни (PD) Паркинсона пациентов, сопутствующей патологии следует характерная картина с участием, в частности, кишечной нервной системы (ENS) 1,2, обонятельной луковице (OB), спинной ядра двигатель блуждающего (DMV) 3, intermediolateral ядре спинного мозга и 4 черной субстанции, что обеспечивает основу для постановки нейропатологических заболевания 4,5. ENS и ОВ наиболее подверженных нервных структур и первыми пострадают. Интересно, что PD было связано с пестицидами 6-8. Здесь мы показываем, подробно двух методов, используемых в нашем предыдущем исследовании 9. Для того чтобы проанализировать последствия ротенон действовать локально на ENS, мы вводить ротенон помощью желудочного зонда до одной летний C57/BL6 мышей. Ротенон является широко используются пестициды, что сильно тормозит митохондриального комплекса I 10. Очень липофильными и плохо всасывается в желудочно-кишечном тракте 11. Наши результаты показали, что введение 5 мг / кг ротенон не ингибирует митохондриальный комплекс Я активности в мышцах или головном мозге. Таким образом, предполагая, что с помощью нашего метода администрации ротенон не пересекали портальный системы и действовал исключительно на ENS. Здесь мы показываем, метод для управления использованием пестицидов зонд и протокола анализа изображений используется для анализа воздействия пестицидов в альфа-синуклеина накопления в ENS. Первая часть показывает метод, который позволяет внутрижелудочного введения пестицидов (ротенон) на желаемую точные концентрации. Второй метод показывает, полуавтоматическая анализа изображений для анализа протоколов альфа-синуклеина накопления в ENS использованием программного обеспечения для анализа изображений.
Protocol
Discussion
Внутрижелудочного введения была ранее выполнявшего 12. Однако, по рукописи Inden, в ротенон вводили растворенный в 0,5% соли карбоксиметилцеллюлозы натрия (CMSS) в одиночку. Ротенон является высокая liphophylic вещества. Таким образом, ротенон не может быть распущен в 0,5% CMSS в одиночку и будет ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Барри Педро де ла Маса Фонд поддержал эту работу.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Rotenone | SIGMA-Aldrich | R8875 | Germany | |
| Chloroform | Carl Roth | 3313.1 | Germany | |
| Carboxymethylcellulose | SIGMA-Aldrich | C5678 | Germany | |
| Gavage 1,2 mm x 60 mm | Unimed | Switzerland | ||
| LSM 510 | Zeiss Microscopes | |||
| FIJI | http://pacific.mpi-cbg.de |
References
- Braak, H., de Vos, R. A., Bohl, J., Del Tredici, K., K, . Gastric alpha-synuclein immunoreactive inclusions in Meissner’s and Auerbach’s plexuses in cases staged for Parkinson’s disease-related brain pathology. Neurosci Lett. 396, 67-72 (2006).
- Wakabayashi, K., Takahashi, H., Ohama, E., Ikuta, F. Parkinson’s disease: an immunohistochemical study of Lewy body-containing neurons in the enteric nervous system. Acta Neuropathol. 79, 581-583 (1990).
- Wakabayashi, K. Restricted occurrence of Lewy bodies in the dorsal vagal nucleus in a patient with late-onset parkinsonism. J Neurol Sci. 165, 188-191 (1999).
- Braak, H., Sastre, M., Bohl, J. R., de Vos, R. A., Del Tredici, K. Parkinson’s disease: lesions in dorsal horn layer I, involvement of parasympathetic and sympathetic pre- and postganglionic neurons. Acta Neuropathol. 113, 421-429 (2007).
- Braak, H., Ghebremedhin, E., Rub, U., Bratzke, H., Del Tredici, K. Stages in the development of Parkinson’s disease-related pathology. Cell Tissue Res. 318, 121-134 (2004).
- Gorell, J. M., Johnson, C. C., Rybicki, B. A., Peterson, E. L., Richardson, R. J. The risk of Parkinson’s disease with exposure to pesticides, farming, well water, and rural living. Neurology. 50, 1346-1350 (1998).
- Semchuk, K. M., Love, E. J., Lee, R. G. Parkinson’s disease and exposure to agricultural work and pesticide chemicals. Neurology. 42, 1328-1335 (1992).
- Butterfield, P. G., Valanis, B. G., Spencer, P. S., Lindeman, C. A., Nutt, J. G. Environmental antecedents of young-onset Parkinson’s disease. Neurology. 43, 1150-1158 (1993).
- Pan-Montojo, F. Progression of Parkinson’s disease pathology is reproduced by intragastric administration of rotenone in mice. PLoS One. 5, e8762-e8762 (2010).
- Sherer, T. B. Mechanism of toxicity in rotenone models of Parkinson’s disease. J Neurosci. 23, 10756-10764 (2003).
- Bove, J., Prou, D., Perier, C., Przedborski, S. Toxin-induced models of Parkinson’s disease. NeuroRx. 2, 484-494 (2005).
- Inden, M. Neurodegeneration of mouse nigrostriatal dopaminergic system induced by repeated oral administration of rotenone is prevented by 4-phenylbutyrate, a chemical chaperone. J Neurochem. 101, 1491-1504 (2007).
