إعداد الأوتار ذيل فأر النشاط الحيوي للدراسات وMechanobiological
Summary
توضح هذه المقالة الإجراءات التجريبية التي استخدمت في إعداد الأوتار ذيل فأر النشاط الحيوي للدراسات وmechanobiological. وأظهرت العديد من الميزات من الخطوات الرئيسية في إعداد وبداية مع الاستخراج ، مستعرضة قياس المجال ، والشطف والتحميل في غرفة مفاعل حيوي.
Abstract
الأوتار ذيل فأر (RTTs) هي نموذج مشترك البيولوجية المستخدمة في الدراسات التجريبية في المختبر في مجال علم وظائف الأعضاء ووتر tendinopathy. العمل مع تلك الأنسجة يشكل تحديا لأنها هشة للغاية ، وحتى الآن لم يكن هناك بروتوكول مفصلة بدقة عن عزلتهم.
مواجهة هذه التحديات ، قمنا بتطوير الأساليب والأدوات اللازمة لتسهيل التلاعب والسيطرة RTTs الأنسجة الجدوى ، والعقم والنزاهة. توضح هذه المقالة الإجراءات التجريبية التي استخدمت في إعداد دراسات عن RTTs النشاط الحيوي وmechanobiological. وينقسم عملنا إلى أربع خطوات رئيسية : الاستخراج ، مستعرضة قياس المجال ، والشطف والتحميل في غرفة مفاعل حيوي.
في كل خطوة ، وتعرض جميع الاجراءات والمواد والتلاعب في التفاصيل بحيث يمكن أن تتكرر بسهولة. وعلاوة على ذلك ، تعرض أدوات محددة وضعت : لوحة التلاعب المستخدمة لعزل RTTs ، وهو ميكرومتر البصري إلى موقف الأنسجة خلال قياس مساحة المقطع العرضي ، ونظام رسو إرفاق RTTs على مفاعل حيوي.
أخيرا ، نحن تصف النتائج التي تم الحصول عليها بعد عدة اختبارات للتحقق من وسائلنا. جدوى ، والعقم والنزاهة التقييمات تثبت أن إجراءات صارمة بما فيه الكفاية لدينا هي للتلاعب من الأنسجة الهشة مثل الأوتار ذيل الفئران.
Protocol
Discussion
من خلال تطبيق هذه الإجراءات التجريبية ، يمكننا إجراء مجموعة واسعة من الدراسات في المختبر على هذا النوع من الأنسجة. وعلى سبيل المثال ، أجريت دراسة على تنكس النسيج بها تطبيق التحفيز تحت لRTTs لمدة عشرة أيام. كل يوم ، وقمنا بتقييم الخصائص الميكانيكية في الأنسجة غير م?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وقد أيد هذا المقال من قبل # 299280 NSERC غرانت ، كما IRSST على منحة لالوالد زاي وFRSQ كما طالب بمنح البحوث الجامعية لسانسسير م. نشكر Yoan يميو – Laneville لأداء التلاعب سجلت على شريط فيديو.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| D-PBS | Reagent | Wisent inc. | 311-410-CL | Saline solution |
| Glucose | Reagent | Wisent inc. | 609-037-EL | Saline solution
1g/L |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Saline solution
1% |
| DMEM | Reagent | Invitrogen Corp. | 12800-017 | Culture solution |
| Sodium Bicarbonate | Reagent | Wisent inc. | 600-105-CG | Culture solution 3.7g/L |
| FBS | Reagent | Wisent inc. | 090150 | Culture solution 10% |
| Antibiotics-antimycotics | Reagent | Invitrogen Corp. | 15240-062 | Culture solution 1% |
| Optic Micrometer | Tool | Custom-made | ||
| Manipulation plate | Tool | Custom-made | ||
| Bioreactor chamber | Tool | Custom-made |
References
- Bennett, M. B., Ker, R., Dimery, N., Alexander, R. Mechanical properties of various mammalian tendons. J. Zool. Lond. A209, 537-548 (1986).
- Dupuis, D. . Déshydratation de matrices collagéniques reconstruites in vitro: effets sur les propriétés mécaniques et histologiques [dissertation]. , 114-114 (1981).
- Haut, R. C. Age-dependent influence of strain rate on the tensile failure of rat tail tendon. Journal of Biomechanical Engineering. 105, 296-299 (1983).
- Huppé, N., Lessard, J. -. L., Langelier, E. A Bioreactor Design for the Mechanobiological Study of Soft Tissue Damage and Repair in Conditions that Provide the Best Approximation of Actual Use. , (1985).
- Langelier, E., Dupuis, D., Guillot, M., Goulet, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Rancourt, D. Cross-sectional profiles and volume reconstructions of soft tissues using laser beam measurements. J Biomech Eng. 126, 796-802 (2004).
- Lee, T. Q., Woo, S. L. -. Y. A new method for determining cross-sectional shape and area of soft tissues. J Biomech Eng. 110, 110-114 (1988).
- Parent, G., Cyr, M., Cousineau-Pelletier, P., Desbiens-Blais, F. &. a. m. p. ;. a. m. p., Langelier, E. Current Techniques for the Evaluation of Cross-Sectional Area in Rat Tail Tendons Generate Significant Errors. , (1985).
