E18 चूहे के दिमाग के Organotypic स्लाइस संस्कृति

Abstract

भ्रूण कृंतक दिमाग से Organotypic टुकड़ा संस्कृतियों का व्यापक रूप से मस्तिष्क के विकास का अध्ययन किया जाता है. जबकि वहाँ अक्सर एक में vivo प्रणाली लाभ, organotypic टुकड़ा संस्कृतियों जोड़तोड़ कि वर्तमान में इन विवो संभव नहीं कर रहे हैं की एक संख्या में प्रदर्शन करने के लिए अनुमति देते हैं. तिथि करने के लिए, organtotypic भ्रूण मस्तिष्क टुकड़ा संस्कृतियों समय चूक माइक्रोस्कोपी का उपयोग करने के लिए व्यक्तिगत कोशिकाओं का पालन करें, ganglionic emanances (एक क्षेत्र है कि में utero electroporation द्वारा लक्ष्य मुश्किल है) में जीन की अभिव्यक्ति में हेरफेर करने के लिए इस्तेमाल किया गया है, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से औषधीय लिए अध्ययन करता है. हम इस वीडियो प्रोटोकॉल में प्रदर्शन कैसे चूहा भ्रूण दिन 18 भ्रूण से organotypic टुकड़ा संस्कृतियों बनाने के लिए. प्रोटोकॉल विदारक भ्रूण, उन्हें कम पिघल agarose में बर्फ पर एम्बेडिंग, टुकड़ा करने की क्रिया vibratome पर एम्बेडेड दिमाग, और अंत में संस्कृति बर्तन में फिल्टर पर स्लाइस चढ़ाना शामिल है. इस प्रोटोकॉल भी दोनों चूहों और चूहों के लिए विभिन्न भ्रूण उम्र से organotypic टुकड़ा संस्कृतियों बनाने के अपने वर्तमान स्वरूप में लागू है.