환자 조직 및 유전자 전달의 시험 전의 VIVO 문화
Summary
이 문서는 유전자 전달 연구와 IVIS의 bioluminescence 이미징을 사용하여 유전자 발현의 후속 분석을 위해 환자의 조직 조각의 문화에 대해 설명합니다.
Abstract
이 동영상은 유전자 전달 연구를위한 전직 생체내 모델로 환자 조직의 사용에 대해 설명합니다. 수술 시에 얻은 신선한 환자 조직은 슬라이스와 문화에 유지됩니다. 전 생체내 모델 시스템은 그대로 환자 조직 및 유전자 발현이 IVIS 탐지 시스템을 사용 bioluminescence 이미징으로 분석됩니다으로 유전자의 물리적인 전달을 허용합니다. 발광 생물 감지 시스템은 조직의 희생을 필요없이 각각의 조각 내의 유전자 발현의 신속하고 정확한 부량을 보여줍니다. 이 슬라이스 조직 문화 시스템은 정상 및 악성 조직을 포함한 조직 유형의 다양한 사용하고 우리는 그대로 조직의 이질적인 자연과 개별 환자 간의 다양성의 높은 수준의 효과를 연구하기 위해 수 있습니다. 이 모델 시스템은 동물 모델의 대안으로 임상 시험을 입력하기 전에 보완 잠복기 모드와 같은 특정 상황에서 사용될 수 있습니다.
Protocol
Discussion
우리는 전직 생체내 환자의 조직 문화 방식이 아닌 고정 인체 조직 내에서 유전자 전달의 평가에 대한 발광 생물 탐지 시스템을 설명합니다. 방법은 culturing 조직 슬라이스의 간단하고 재현성 방법을 제공합니다. 그것이 악성 조직을 포함하는 인간 조직의 다양한으로 그대로 인간의 조직에 유전자 전달 연구, 유전자 전달의 분석을 허용하고 존중 개별 환자 간의 다양성의 높은 수준의 효과?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 코르크 사우스 의무실 빅토리아 대학 병원 유방 펀드, 아일랜드 암 협회 (CRI07TAN)와 코르크의 암 연구 센터를 통해 투자되었다. CMV 프로 모터의 transcriptional 통제 복제 무능한 재조합 아데노 바이러스 5 입자 교수 앤드류 베이커 글래스고 대학에서 일종의 선물했다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Switzerland | |||
| Dermabond | Johnson & Johnson | |||
| Vibrotome | Leica microsystems | VT 1000 A |
References
- van de Bovenkamp, M., Groothuis, G. M., Draaisma, A. L., Merema, M. T., Bezuijen, J. I., van Gils, M. J. Precision-cut liver slices as a new model to study toxicity-induced hepatic stellate cell activation in a physiologic milieu. Toxicol Sci. 85, 632-638 (2005).
- Speirs, V., Green, A. R., Walton, D. S., Kerin, M. J., Fox, J. N., Carleton, P. J. Short-term primary culture of epithelial cells derived from human breast tumours. Br J Cancer. 78, 1421-1429 (1998).
- Kirby, T. O., Rivera, A., Rein, D., Wang, M., Ulasov, I., Breidenbach, M. A novel ex vivo model system for evaluation of conditionally replicative adenoviruses therapeutic efficacy and toxicity. Clin Cancer Res. 10, 8697-8703 (2004).
- Josserand, V., Texier-Nogues, I., Huber, P., Favrot, M. C., Coll, J. L. Non-invasive in vivo optical imaging of the lacZ and luc gene expression in mice. Gene Ther. 14, 1587-1593 (2007).
