אקס תרבות Vivo של רקמות החולה & בחינת משלוח ג'ין
Summary
מאמר זה מתאר את תרבות פרוסות הרקמה החולה למסירה מחקרים גנים ניתוח בדיעבד של התבטאות גנים באמצעות דימות IVIS פליטת אור.
Abstract
וידאו זה מתאר את השימוש של רקמה חולה כמודל vivo לשעבר לחקר משלוח גן. הרקמה החולה טריים שהושגו בזמן הניתוח הוא פרוס ומתוחזק בתרבות. מערכת מודל לשעבר vivo מאפשר משלוח פיזי של גנים לתוך הרקמה החולה שלם ביטוי גנים מנותח על ידי פליטת אור הדמיה באמצעות מערכת זיהוי IVIS. מערכת זיהוי bioluminescent מדגים כימות מהיר ומדויק של ביטוי גנים בתוך פרוסות בודדות ללא צורך להקריב רקמות. רקמה זו פרוסה מערכת התרבות ניתן להשתמש במגוון של סוגי רקמות כולל הרקמות וממאירים ומאפשרת לנו לחקור את ההשפעות של אופי הטרוגני של רקמות שלמות ועל רמה גבוהה של השונות בין חולים בודדים. מערכת זו יכולה לשמש מודל במצבים מסוימים כחלופה במודלים של בעלי חיים וכן במצב קליני משלימים לפני הכניסה לניסוי קליני.
Protocol
Discussion
אנו מתארים vivo לשעבר החולה רקמות תרבות שיטה ומערכת זיהוי bioluminescent להערכת משלוח הגן בתוך הרקמה הלא קבוע האנושי. השיטה מציעה דרך פשוטה לשחזור של פרוסות הרקמה culturing. יש לו פוטנציאל משמעותי שכן היא מאפשרת את לימוד משלוח הגן לתוך רקמה אנושית שלם, ניתוח ואספקה הגן לתו…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו מומנה דרך קורק בדרום מרפאת קופת ויקטוריה אוניברסיטת השד בבית החולים, האגודה למלחמה בסרטן אירי (CRI07TAN) לבין סרטן קורק מרכז המחקר. פסול שכפול רקומביננטי adenovirus 5 חלקיקים בשליטת תעתיק של האמרגן CMV הייתה מתנה סוג של פרופ 'אנדרו בייקר, מאוניברסיטת גלזגו.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Switzerland | |||
| Dermabond | Johnson & Johnson | |||
| Vibrotome | Leica microsystems | VT 1000 A |
References
- van de Bovenkamp, M., Groothuis, G. M., Draaisma, A. L., Merema, M. T., Bezuijen, J. I., van Gils, M. J. Precision-cut liver slices as a new model to study toxicity-induced hepatic stellate cell activation in a physiologic milieu. Toxicol Sci. 85, 632-638 (2005).
- Speirs, V., Green, A. R., Walton, D. S., Kerin, M. J., Fox, J. N., Carleton, P. J. Short-term primary culture of epithelial cells derived from human breast tumours. Br J Cancer. 78, 1421-1429 (1998).
- Kirby, T. O., Rivera, A., Rein, D., Wang, M., Ulasov, I., Breidenbach, M. A novel ex vivo model system for evaluation of conditionally replicative adenoviruses therapeutic efficacy and toxicity. Clin Cancer Res. 10, 8697-8703 (2004).
- Josserand, V., Texier-Nogues, I., Huber, P., Favrot, M. C., Coll, J. L. Non-invasive in vivo optical imaging of the lacZ and luc gene expression in mice. Gene Ther. 14, 1587-1593 (2007).
