Экс Vivo культуры тканей пациента и изучение генов доставки
Summary
В этой статье описывается культура пациента ломтиками ткани для доставки генов исследования и последующего анализа экспрессии генов использованием ИВИС биолюминесценции изображений.
Abstract
Это видео описывает использование тканей пациента, как бывшие модели естественных условиях для изучения доставки генов. Свежий ткани пациента получены во время операции нарезанный и поддерживаться в культуре. Бывшие модели системы естественных условиях позволяет физическая доставка генов в неповрежденной ткани пациента и экспрессии генов анализируется биолюминесценции визуализации с использованием системы ИВИС обнаружения. Биолюминесцентного системы обнаружения демонстрирует быстрое и точное количественное экспрессии генов в отдельных ломтиков без необходимости ткани жертвы. Эта культура срез ткани система может быть использована в самых разных типов тканей, включая нормальных и злокачественных тканей и позволяет изучать последствия гетерогенный характер неповрежденной ткани и высокая степень изменчивости между отдельными пациентами. Эта модель система может быть использована в определенных ситуациях в качестве альтернативы животных моделях и в качестве дополнительного доклинических режиме до входа в клинических испытаниях.
Protocol
Discussion
Мы описываем бывших естественных тканей пациента методом культуры и биолюминесцентного системы обнаружения для оценки доставки генов в нефиксированной ткани человека. Метод предлагает простые и воспроизводимые способ ломтиками культивирования тканей. Он имеет значительный по…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа финансировалась через Корк Южной больнице Виктория университетской больницы груди фонда, ирландского общества рака (CRI07TAN) и Научно-исследовательского онкологического центра Корка. Репликация некомпетентных рекомбинантный аденовирус 5 частиц под транскрипционным контролем промотора CMV был своего рода подарок от профессора Эндрю Бейкер, Университет Глазго.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Switzerland | |||
| Dermabond | Johnson & Johnson | |||
| Vibrotome | Leica microsystems | VT 1000 A |
References
- van de Bovenkamp, M., Groothuis, G. M., Draaisma, A. L., Merema, M. T., Bezuijen, J. I., van Gils, M. J. Precision-cut liver slices as a new model to study toxicity-induced hepatic stellate cell activation in a physiologic milieu. Toxicol Sci. 85, 632-638 (2005).
- Speirs, V., Green, A. R., Walton, D. S., Kerin, M. J., Fox, J. N., Carleton, P. J. Short-term primary culture of epithelial cells derived from human breast tumours. Br J Cancer. 78, 1421-1429 (1998).
- Kirby, T. O., Rivera, A., Rein, D., Wang, M., Ulasov, I., Breidenbach, M. A novel ex vivo model system for evaluation of conditionally replicative adenoviruses therapeutic efficacy and toxicity. Clin Cancer Res. 10, 8697-8703 (2004).
- Josserand, V., Texier-Nogues, I., Huber, P., Favrot, M. C., Coll, J. L. Non-invasive in vivo optical imaging of the lacZ and luc gene expression in mice. Gene Ther. 14, 1587-1593 (2007).
