Farenin tükürük bezi kök hücrelerin izolasyonu için optimize edilmiş bir protokol açıklanmıştır. Yöntemi, enzimatik ve mekanik sindirim istihdam ve hücrelerin kök hücre özelliklerini içeren salispheres izolasyonu izin verir.
Olgun insan ve fare kökenli tükürük bezleri, ağız boşluğuna tükürük üretimi ve atılımını kolaylaştırır, her biri beş hücre tipleri, en az oluşmaktadır. Seröz ve mukoza asiner hücrelerinin sırasıyla protein ve mukoz bezi üreten fabrikalar ve tükürük üretimi kökeni temsil eder. Sentezlenmiş, tükürük çeşitli enzimatik ve diğer protein bileşenleri, tükürüğün ağız boşluğuna önemli bir kanal vasıtasıyla nihai uzaklaştırma kadar duktal hücrelerin epitel-tipi morfolojisi taşıyan bir dizi aracılığıyla salgılanan. Tükürüğün bileşimi de bu işlem sırasında duktal hücreler tarafından değiştirilir.
Sjögren sendromu gibi hastalıkların belirtisi ve bezleri tarafından baş ve boyun kanserleri, tükürük üretimi için radyoterapi gibi bazı klinik durumlarda, dramatik bir şekilde 1,2 azalır . Ağız kuruluğu, ağız kuruluğu öznel bir duygu, yutmak ve konuşma yeteneği hastanın sadece etkiler, ama aynı zamanda diş çürüğü gelişmesine teşvik eder ve dertli sosyal zayıflatıcı olabilir.
Bu nedenle tükürük üretimi yukarıda bahsedilen klinik koşullarda restorasyon karşılanmamış bir klinik ihtiyaç temsil eder ve tükürük bezleri 3-5 rejeneratif kapasitesi gibi çeşitli çalışmalar göstermiştir . Izolasyon, fare ve insan bedenleri 6-8 içinde çeşitli dokulardan hücrelerinin, kök hücre benzeri popülasyonlarının Ayrıca, fare tükürük bezleri izole edilen kök hücreleri, ışınlanmış tükürük tükürük üretimini kurtarmak için kullanılabilir olması açıklanan yöntemi kullanarak göstermiştir bezleri 9,10. Bu keşif, kendini yenileyen multipotent yetenekleri ile hücreler içeren bir mikro olarak tükürük bezi keşfi için de insanlarda xerostomic koşulların tedavisi için kök hücre tabanlı tedavilerin geliştirilmesi için önünü açıyor.
Burada anlatılan doku kültürü yöntemi kök hücre içeren farelerin tükürük bezleri salispheres izolasyonu için tekrarlanabilir bir protokol temsil. Bu şekilde izole hücreler kullanılarak yapılan çalışmalar, tükürük bezi kök hücreler 9 rejeneratif kapasitesi sermiştir . Salispheres türetilen c-Kit + hücreler yüz Nakli ışınlanmış fare tükürük bezlerinin fonksiyonel iyileşmeye neden olmuştur. Bu veriler, heyecan verici ve kserostomi için kök hücre tabanlı tedavi soruşturulması için bir başlangıç noktası sağlamak. Birçok caddeler, ancak kök hücrelerin tam işaretleyici protein ekspresyon profili, ışınlanmış tükürük bezleri parotis ve tersi işlevi kurtarmak için submandibular bezleri yeteneği ve in vivo kök hücre niş varsayılan karakterizasyonu da dahil olmak üzere keşfedilmeyi beklemektedir hücreler. Sonuçta, bu protokolün, insan doku örnekleri ve izole hücreler kullanarak insan hastalarda kserostomi tedavisi için sonraki potansiyel çeviri açıklanan yöntemin en heyecan verici bir uygulamadır.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Hyaluronidase | Sigma | H3506 | Store at – 20 °C | |
Collagenase II | Gibco | 17101-015 | Store at 4 °C | |
Epidermal Growth Factor-2 | Sigma | E9644 | Make a stock of 10 μg / mL in phosphate buffered saline (PBS). Store at – 20 °C in single use aliquots. | |
Fibroblast Growth Factor-2 | Sigma | F0291 | Make stock of 25 μg / mL in PBS. Store at – 20 °C in single use aliquots. | |
N2 supplement | Gibco | 17502-048 | As manufacturer instructions. | |
Insulin | Sigma | I6634 | Make stock of 2 mg / mL in tap water. Adjust water to pH 2-3 using glacial acetic acid prior to dissolving. | |
Dexamethasone | Sigma | D4902 | ||
100 μM pore-size sterile cell strainers | BD Falcon | 352360 | ||
Polystyrene round-bottomed tubes with cell strainer caps (50 μM pore size) | BD Falcon | 352235 |