Tumores de bexiga são estabelecidos em camundongos fêmeas, de uma forma minimamente invasiva através de cateterismo, cauterização local, ea adesão posterior de células de carcinoma aos locais queimar.
Abstract
Neste procedimento simples, tumores de bexiga são estabelecidos em camundongos fêmeas C57 através do uso de cateterismo, cauterização local, e adesão celular subseqüente. Após a sua bexigas são transurethrally cateterizada e escorrido, os animais são novamente cateterizada para permitir a inserção de um fio de platina em bexigas sem danificar a uretra ou bexiga. Os cateteres são feitos de Teflon para servir como um isolante para o fio, que irá conduzir a corrente elétrica para a bexiga para criar um ferimento de queimadura. Uma unidade de eletrocautério é usada para fornecer 2,5 W para a extremidade exposta do fio, queimando camadas extracelular e proporcionando locais de fixação para células de carcinoma que são entregues em suspensão para a bexiga através de um cateterismo subseqüente. Células permanecem na bexiga durante 90 minutos, após o que os cateteres são retirados e as bexigas permitido para drenar naturalmente. O desenvolvimento de tumor é monitorado através de ultra-som. Especial atenção é dada à técnica de cateterismo no vídeo que acompanha.
Protocol
1. Animais Feminino C57BL/6J camundongos (Mus musculus) são verificados livres de ectoparasitas contagiosa, helmintos endoparasitas e anticorpos para 17 vírus murino pelo fornecedor antes do envio. Os ratos são alojados nas instalações animais AAALAC credenciados da Universidade de Tulane, em conformidade com o Guia para Cuidado e Uso de Animais de Laboratório 1. Especificamente, os ratos são alojados em grupo (4-5 ratos / gaiola) em policarbonato individualmente …
Discussion
Este método minimamente invasivo de estabelecer tumores de bexiga ortotópica em camundongos fêmeas também pode ser aplicado para outros tipos de células que MB49, embora os resultados divergentes devem ser antecipados. Quando as células menos agressiva do tumor são usados, aumentando a potência ligeiramente (usando incrementos de 0,5 W para estabelecer o ótimo novo) trará uma área mais passíveis de penhora de células tumorais, e mais tempo de incubação da bexiga para as células instilado vai render uma q…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Este trabalho foi financiado pela concessão de CARREIRA do National Science Foundation (CBET-0846395) e do Departamento de Medicina Comparativa, Tulane University.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
C57Bl/6J mice
Jackson Laboratories
000664
3-5-wk-old
Polycarbonate cages and ventilated rack
Lab Products
Super Mouse 750
327mm x 190mm x 143mm
Hardwood Bedding
Harlan Teklad
Laboratory –grade SaniChips
Rodent diet
Harlan Teklad
Rodent Diet 2019
IV Catheter
MWI
009231
24 G x ¾ in.
Electrocautery unit
Bovie Medical Corporation
Aaron 900
Ultrasound unit
Sonosite
180 Plus (Vet)
MB49 cell line
Anthony Atala, Wake Forest University Baptist Medical Center